Coloração de Gram
Coloração de Gram
A principio, a coloração de Gram foi desenvolvida pelo bacteriologista dinamarquês Hans Christian Gram em 1884. No mundo microbiologico, esse procedimento é considerados um dos mais eficazes para a classificação das bactérias, que consiste em dois grupos: gram-positivas e gram-negativas.
Coloração e Corantes
A coloração significa simplesmente corar os microrganismos com um corante que enfatiza certas estruturas.
Os corantes são sais compostos de um íon positivo e um íon negativo, um dos quais é colorido e é conhecido como cromóforo. A cor dos assim chamados corantes básicos está no íon positivo, em corantes ácidos, está no íon negativo. As bactérias são levemente carregadas negativamente em pH 7. Portanto, o íon positivo colorido em um corante básico é atraído à célula bacteriana carregada negativamente. Os corantes básicos, que incluem azul de metileno e safranina, são usados mais comumente que os corantes ácidos. Os corantes ácidos não são atraídos pela maioria dos tipos de bactérias, pois os íons negativos do corante são repelidos pela superfície bacteriana carregada negativamente, assim, a coloração cora o fundo. A preparação de bactérias incolores contra um fundo corado é denominada coloração negativa. Ela é valiosa na observação da forma geral da bactéria, tamanho e capsula, pois a bactéria torna-se bem visível contra um fundo escuro contrastante. As distorções do tamanho e da forma das bactérias são minimizadas, pois a fixação pelo calor não é necessária e as bactérias não captam a coloração. Exemplos de corantes ácidos são a eosina e a fucsina ácida. Para aplicar corantes ácidos ou básicos, os microbiologistas usam mais comumente a técnica de coloração de Gram, que consiste em um modo de coloração diferencial.
Os corantes diferenciais reagem de modo distinto com tipos diferentes de bactérias; portanto, podem ser usadas para diferenciá-las.
Procedimentos da coloração de Gram
1. Em uma lâmina,