Caracterização de uma enzima

CENTRO UNIVERSITÁRIO CAMPOS DE ANDRADE

CARACTERIZAÇÃO DE UMA ENZIMA

Relatório Nº 3, submetido às avaliações bimestrais da disciplina de Bioquímica Geral do curso de Nutrição, 2º período.
Profª Neuza Maria Ferraz de Mello Gonçalves

CURITIBA
2014
1 INTRODUÇÃO
As enzimas são consideradas proteínas especializadas na catálise de reações biológicas, praticamente todas as reações que caracterizam o metabolismo celular são catalisadas por enzimas.
As enzimas aceleram a velocidade de uma reação, sem participar dela como reagente ou produto, regulam o conjunto complexo de reações, portanto são consideradas unidades funcionais do metabolismo celular.
A urease catalisa a hidrólise de uréia emdióxido de carbono e amônia. A urease é uma proteína e tem como objetivo identificar o carbonato de amônio através do vermelho de fenol.
Encontra-se principalmente em sementes, microrganismos e invertebrados. Nas plantas, o cofator enzimático da urease é o íon metálico Ni 2+ portanto, a presença de íons de níquelativa o sítio da urease é essencial tanto para a atividade funcional como para a integridade estrutural dessa enzima.

2 OBJETIVOS

2.1 Caracterizar a estrutura molecular da presente amostra.
2.2 Verificar na prática se as ligações são positivas para o processo enzimático.
2.3 Verificar atividade, especificidade, processo de desnaturação pelo calor e pelos metais pesados.

3 MATERIAL E MÉTODO 3.1 MATERIAL 3.1.1 EQUIPAMENTOS - Balança analítica, - Geladeira, - Capela, - Banho –Maria.

3.1.2 REATIVOS
- Enzima uréase, - Solução de biureto, - Ácido nítrico concentrado,
- Vermelho de fenol, - Tampão fosfato pH 7, - Cloreto de mercúrio 3.1.3 VIDRARIA - Tubos de ensaio, - Pipeta. 3.1.4 ACESSÓRIOS
-Estante para tubos, - Pêra, - Conta-gotas, - Pisete com água, - Toalhas descartáveis.

3.2 MÉTODO

3.2.1 CARACTERIZAÇÃO
1-REAÇÃO DE BIURETO:
Em um tubo de ensaio pipetar 10 gotas da solução