Biotecnologia

1 - Qual o componente principal para clonagem molecular e como ele é aplicado?
R: vetor de clonagem (plasmídeo) irá receber o fragmento a ser clonado e posteriormente inserido em uma célula hospedeira, geralmente E. coli, onde ocorrerá a multiplicaçõa da molécula de DNA recombinante.

2 – Como é caracterizada a técnica de polimorfismo de tamanhos de restrição (explicar)? R: se baseia na digestão por enzimas de restrição do DNA. Após a digestão, ococorre fragmentação do DNA, refletida pela sua composição nucleotidica. Organismos com sequencias nucleotidicas distintas apresentarão um padrão de corrida em gel diferentes.
3 – O que são sequências políndromes?
R: Um palíndromo é uma palavra, frase ou qualquer outra sequência de unidades (como uma cadeia de ADN; Enzima de restrição) que tenha a propriedade de poder ser lida tanto da direita para a esquerda como da esquerda para a direita.

4 – Quais são os captores que agem como doador muito estável de íons para a Taq Dna Polimerase? R: Magnesio
5 – explique como são desenhados os iniciadores para sintetizar um trecho de Dna no sentido inverso 3’ – 5’? o primeiro passo é conhecer a sequencia complementar. Uma vez conhecida a sequencia de interesse deve se adotar os passos básicos para o desenho dos primers ( conteúdo G-C, temperatura de anelamento, formação de dímeros e etc)
6 – Explique as seguintes sentenças:
a) O Dna se precipita na presença do etanol absoluto.
O Dna não é solúvel em álcool, consequentemente irá preciptar.
b) A temperatura de anelamento depende do conteúdo G-C.
Porque as ligações do tipo ponte de hidrogênio entre Guanina e citosina são triplas, portanto quanto maior o conteúdo de GC maior será a temperatura de anelamento. (muito GC acaba sendo ruim na sequencia pq é mais difícil para anelar Tb)
c) A extesnão da fita de Dna ocorre a 72°c
Porque é a temperatura na qual a taq polimerase apresenta a temperatura OT de atividade (polimerização da fita/adição de nucleotideos) (é quando