Bioquímica - Amilase salivar

Introdução:
A atividade enzimática pode ser avaliada medindo-se a velocidade de consumo do substrato ou a velocidade de aparecimento do produto. Esta atividade depende de vários fatores, tais como o tempo de reação, a concentração da enzima, a concentração do substrato, a temperatura, o pH do meio e a presença de cofatores e/ou inibidores. Nesta aula prática foi avaliada a atividade da amilase salivar.
Prática 1:
Materiais utilizados: 6 tubos de ensaio 2 ml de saliva Água destilada pura Água destilada contendo 1% de NaCl
Procedimentos:
Foi acrescentado 2 ml de saliva no tubo 1 e colocado 2 ml de água destilada nesse mesmo tubo, nos outros 6 tubos foi colocado somente água destilada. Depois de misturado a solução no tubo 1 foram passados 2 ml da solução para o tubo 2, depois a mesma quantia para o tubo 3 e, assim, sucessivamente até o tubo 6. O tubo 1 ficou com uma concentração de 1:50, o 2 ficou com 1:100, o 3 com 1:200, o 4 com 1:400, o 5 com 1:800 e o 6 com 1:1600. Após isso, foram removidos 2 ml do tubo 1 e do tubo 6 que ficaram com 2 ml de solução como o resto dos tubos. Na sequência, foi adicionado 1 ml de solução 1% de amido em cada tubo, agitou-se e manteve essa solução em temperatura ambiente por 15 minutos. No fim, foi adicionado 2 gotas de lugol e observou-se o resultado do experimento. Após isso o teste foi repetido, porém com água destilada contendo 1% de NaCl no lugar da água destilada pura.
Resultados:
Nos tubos os quais foram adicionados água destilada na presença de NaCl, tiveram a atividade enzimática aumentada (reagente alostérico positivo). Assim, uma maior quantidade de tubos teve a ação da amilase salivar, que degradou o amido presente, tornando a coloração mais clara nos tubos de 1 a 4. Já os tubos 5 e 6, por apresentarem uma quantidade muito pequena de amilase, não degradaram o amido presente e apresentaram uma coloração escura. Já nos tubos os quais foram adicionados água destilada pura, apenas os tubos 1 e 2 apresentaram