Avaliação da atividade da amilase salivar

Universidade Federal de Santa Catarina Aula Prática 4
Centro de Ciências Biológicas Semestre: 2011/1
Departamento de Bioquímica

Disciplina: BQA 7208 - Bioquímica Básica
Roteiro para aula prática: Avaliação da atividade da amilase salivar.

INTRODUÇÃO:

A atividade enzimática pode ser avaliada medindo-se a velocidade de consumo do substrato ou a velocidade de aparecimento do produto. Esta atividade depende de vários fatores, tais como o tempo de reação, a concentração da enzima, a concentração do substrato, a temperatura, o pH do meio e a presença de cofatores e/ou inibidores. Para exemplificar estes conceitos, nesta aula prática será avaliada a atividade da amilase salivar. A (-amilase é encontrada nos animais (sangue, saliva e suco pancreático), plantas, fungos e bactérias. Esta enzima é um endo-amilase e hidrolisa as ligações glicosídicas do amido, glicogênio, poli e oligossacarídeos ao acaso. Como resultado da ação não ordenada da amilase salivar, obtém-se rapidamente uma mistura complexa de produtos de hidrólise que incluem: amido solúvel, maltodextrinas, maltoses, e, eventualmente, glicose. Na boca, a amilase salivar tem participação na digestão de carboidratos. A amilase pancreática é a maior responsável pela digestão glicídica no duodeno. Esta enzima é também normalmente encontrada no soro e a elevação de sua atividade enzimática sérica pode auxiliar no diagnóstico de diversas patologias pancreáticas (obstrução, tumores, pancreatite aguda, etc). O amido é composto pela amilose (não-ramificada) e amilopectina (ramificada). A amilose forma micelas hidratadas que adsorvem IODO, presente na solução de lugol, em suas espirais helicoidais, apresentando coloração azul-violeta.

OBJETIVOS:

1. Avaliar a ação da amilase salivar sobre o seu substrato (amido); 2. Verificar o efeito do pH sobre a atividade da amilase salivar.

PROCEDIMENTOS:

A. ATIVIDADE DA AMILASE SALIVAR

1. Preparação da solução de saliva
- Um aluno do grupo