bioquimica metabolica
ESPECTROFOTOMETRIA
Ana Paula Coqueiro
Rafaela Odorico
Tamires Alves
Thaisi Alvarindo
Thinaiá Araujo
ILHÉUS – BA
Setembro/2013
INTRODUÇÃO
O conhecimento da absorção de luz pela matéria é a forma mais usual de determinar a concentração de compostos presentes em solução. A maioria dos métodos utilizados em bioquímica clínica envolve a determinação espectrofotométrica de compostos corados ( cromóforo) obtidos pela reação entre o composto a ser analisado e o reagente (reagente cromogênico), originando um produto colorido. Os métodos que se baseiam nesse princípio são denominados métodos colorimétricos, os quais geralmente são específicos e muito sensíveis. A grande vantagem em utilizar compostos coloridos deve-se ao fato de eles observarem luz visível (região visível do espectro eletromagnético).
A espectrofotometria – medida de absorção ou transmissão de luz – é uma das mais valiosas técnicas analíticas amplamente utilizadasem laboratórios de área básica bem como em análises clínicas. Por meio dessa espectrofotometria componentes desconhecidos de uma solução podem ser identificados por seus espectros característicos ao ultravioleta, visível, ou infravermelho.
Quando um feixe de luz monocromática atravessa uma solução com moléculas absorventes, parte da luz é absorvida pela solução e o restante é transmitido. A absorção de luz depende basicamente da concentração das moléculas absorventes e da espessura da solução – caminho óptico.(Figura 1.1)
OBJETIVO
Observar a técnica de espectrofotometria, analisar os dados obtidos e suas aplicações.
MATERIAIS
04 Tubos de ensaio de 10 ml;
Solução de dicromato de potássio (K2Cr2O7);
Água destilada;
Béquer;
Pipeta graduada de 5 ml;
Espectrofotômetro.
PROCEDIMENTOS
1. Foramidentificados com uma caneta marcadora os tubos de ensaio vazios, com os números 1,2,3 e 4;
2. Colocou-se cerca de 40 mL de água destilada em um béquer;
3. Com