Artigo 1
ISSN 0102-6380
ESTUDO COMPARATIVO ENTRE TÉCNICAS DE EXTRAÇÃO
DE DNA E REALIZAÇÃO DA REAÇÃO EM CADEIA DA
POLIMERASE (PCR) PARA O DIAGNÓSTICO
DE Theileria equi E Babesia caballi
(COMPARATIVE STUDY OF DNA EXTRACTION TECHNIQUES AND ITS USE IN THE POLYMERASE
CHAIN REACTION (PCR) FOR THE DIAGNOSIS OF Theileria equi AND Babesia caballi)
(ESTUDIO COMPARATIVO ENTRE TÉCNICAS DE EXTRACCIÓN DE DNA Y REALIZACIÓN DE LA
REACCIÓN EN CADENA DE LA POLIMERASA (PCR) PARA EL DIAGNÓSTICO DE Theileria equi Y
Babesia caballi)
P. A. CANOLA*1, R. OLIVEIRA2, C. D. BALDANI3, R. Z. MACHADO4
RESUMO
A Theileria equi e a Babesia caballi são os agentes causadores da babesiose eqüina. É uma doença de caráter cosmopolita, transmitida por carrapatos, presente em áreas que abrigam 90% da população eqüina mundial. O diagnóstico da babesiose eqüina pode ser realizado, laboratorialmente, tanto na sua forma clínica como subclínica, por métodos diretos e indiretos. No presente estudo, foi avaliada a viabilidade de quatro métodos de extração de DNA (fenol-clorofórmio; método do CHELEX 100; DNAzol® BD Reagent e GFX Genomic Blood DNA Purification Kit), com a utilização de amostras de sangue controle. Adicionalmente, sangue de 25 animais aparentemente normais, provindos da região noroeste do estado de São Paulo foram testados para a presença de T. equi e B. caballi pelo método da PCR. O método do fenol-clorofórmio foi o mais eficiente na extração do DNA babesial. Não foi observado produto amplificado pela PCR em nenhum animal testado, entretanto, o método da PCR foi capaz de detectar DNA de T. equi e B. caballi em amostras de sangue controle.
PALAVRAS-CHAVE: Eqüino. Theileria equi. Babesia caballi. PCR
SUMMARY
Theileira equi and Babesia caballi are the causing agents of equine babesiosis. It is a cosmopolitan disease transmitted by ticks present in areas that range 90% of the world equine population. The diagnosis of equine babesiosis