Análise específica de glicose pelo método enzimático
OBJETIVO
Dosagem de carboidrato e análise específica da glicose pelo método enzimático.
MATERIAIS E MÉTODOS
Seringa, garrote, agulha, álcool, algodão, tubos de ensaio, estante universal para tubos de ensaio, pipeta volumétrica, macro pipeta, micro pipeta, centrífuga, banho- Maria, espectrofotômetro, cubeta, ponteira de micro e macro pipeta, fluoreto de sódio, soro sangüíneo, reagente de cor, branco * Tirou-se 3 Ml de sangue; * Transferiu o sangue da seringa para o tubo de ensaio; * Colocou o tubo de ensaio na centrifuga separando o soro do sangue parte líquida da parte sólida; * Separou 3 tubos de ensaio identificando-os em Branco, Padrão e Teste; * No tubo Branco acrescentou apenas 1 Ml de reagente de cor, no tubo padrão acrescentou-se reagente de cor 1 Ml e 10 Ml de solução padrão e no tubo teste acrescentou reagente de cor 1 Ml e 10 Mµ do soro sangüíneo; * Colocou-se os 3 tubos em banho Maria durante 10 minutos e pudemos observar a mudança de coloração no tubo padrão e teste ; * Depois do banho Maria colocou-se 1º a cubeta do branco no espectrofotômetro para evitar a retratação, refração e perda de luz; * Depois mediu a absorbância padrão e a absorbância teste.
RESULTADO
Ct = At×CpAp →Ct= 0,17×100o,16 →Ct=106,25 mg/dl
O valor de referência da glicose é de 60-110 mg/dl e o resultado da paciente foi de 106,25 mg/dl estando no valor considerado normal pelo valor de referência.
CONCLUSÃO
Na aula prática usamos o método enzimático para descobrir qual o valor de glicose de uma das alunas, neste método a glicose é oxidada enzimaticamente pela glicose oxidase, em ácido glucônico e água oxigenada. A água oxigenada em presença de peroxidase irá produzir uma copulação oxidativa do fenol com a 4-aminofenazona, dando lugar à formação de um cromógeno vermelho, que será medidp fotometricamente.