AMILASE

AMILASE CNPG Liquiform
Instruções de Uso

Finalidade . Sistema para determinação da α-Amilase em amostras de sangue, urina e outros líquidos biológicos.
[Somente para uso diagnóstico in vitro]

Princípio . A α-Amilase hidrolisa o substrato 2-cloro-p-nitrofenil-α-Dmaltotriosídeo (CNPG3), liberando 2-cloro-4-nitrofenol (CNP) e formando 2-cloro-4-nitrofenil-α-D-maltosídeo (CNPG2), maltotriose
(G3) e glicose (G). A velocidade de formação de 2-cloro-4-nitrofenol pode ser medida fotometricamente e proporciona uma medida direta da atividade da α-Amilase na amostra. α-amilase 10 CNPG3

9CNP + 1 CNPG2 + 9G3 + 1G

Características do sistema . Os métodos mais recentes para determinação da α-Amilase se baseiam na produção de p-nitrofenol a partir da hidrólise de substratos oligossacarídeos bem definidos, com grupos bloqueadores ligados ao resíduo de carboidrato terminal. A ação hidrolítica da α-Amilase nesses oligossacarídeos produz várias cadeias de tamanhos diferentes, sendo necessária acoplar reações enzimáticas auxiliares para liberar o p-nitrofenol. Em muitos casos, a presença de traços de amilase como contaminante das enzimas auxiliares diminui consideravelmente a estabilidade desses substratos.
O ensaio proposto utiliza um substrato cromogênico, 2-cloro-pnitrofenol, ligado à maltotriose. A α-Amilase atua diretamente nesse substrato, liberando uma quantidade maior que 90% do cromóforo CNP, cuja velocidade de formação pode ser medida em modo cinético. Utilizase um substrato em meio líquido, que não requer o emprego de enzimas auxiliares para a formação do produto corado, obtendo-se então uma prolongada estabilidade do substrato.
O sistema Labtest é facilmente aplicável em analisadores automáticos e semi-automáticos capazes de medir uma reação cinética em 405 nm. A elevada linearidade do ensaio diminui consideravelmente o número de amostras que necessitam ser diluídas.

Metodologia .

Ref.: 142

MS 10009010053

O reagente não aberto, quando armazenado nas condições