Western Blotting

Métodos sorológicos de diagnóstico, quase não são utilizados, pois o nível de vírus circulante encontra-se abaixo do limite de detecção destes exames. Outros dois testes laboratoriais também são utilizados, testes imunoenzimáticos e o teste de Western blotting. Resultados falso negativos podem ocorrem em animais na fase inicial e final da doença, já resultados falso positivos podem acontecer em filhotes com até 6 meses de vida devido à anticorpos maternos. Não há muito a se fazer para…

controle (CTL), tratadas com siRNA controle (SCR) e com siRNA para p53 (p53 siRNA) na linhagem celular TE-1 cultivada à 32 e 37oC...................................................................................................... 58 Figura 13: Western blotting da proteína TDG purificada e do extrato de células TE-1 utilizando anticorpo anti-TDG e anti-SUMO...................................................... 59 Figura 14: Expressão protéica da TDG nas amostras controle (CTL), tratadas…

Focalização Isoelétrica.........................................................................................16 2.3.4 Método Bidimensional......................................................................................... 17 2.3.5 Western Blotting.................................................................................................18 3. Realização da Eletroforese.................................................................................19 4. Referências…

positivos. Essa prova era realizada nos equídeos que apresentavam sinais clínicos da doença ou que resultavam positivo na prova de FC. A partir de outubro de 2013 foi autorizado pelo MAPA a utilização do diagnóstico de mormo através da técnica de Western Blotting (WB), a fim de minimizar erros de interpretação de leitura em casos que a reação da PM era discreta e desacompanhada de outros sinais como secreção ocular, blefaroespasmos ou fotofobia. Foram realizados 42 testes de WB, sendo…

.........................................................................................................13 7.2 Eletroforese.............................................................................................................15 7.3 Western blotting......................................................................................................17 8. Farmacoterapia da insulina recombinante................................................................18 9. Referências............

Diagnóstico sorológico de várias doenças infecciosas como a doença de chagas, a SIDA/AIDS, as hepatites e complexos em doenças auto-imunes. É uma técnica onde se consegue alta sensibilidade (fluorescência é mais intensa) e especificidade. Western Blotting Eletroforese de proteínas Identifica antígenos ou anticorpos Radioimunensaio (RIE) Definição 1- O termo radioimunoensaio (RIA) é mais empregado em ensaios com antigeno marcados. 2- O termo imunorradiometrico (IRMA) é…

apresenta algumas sutilezas: Primeiro, a maior parte das moléculas codificadas no material genético, que consequentemente são parte do fenótipo, não são visíveis na aparência do organismo, ainda que sejam observáveis (por exemplo, por técnicas de Western blotting). Um bom exemplo é o tipo sanguíneo em humanos. Segundo, o fenótipo não é meramente um produto do genótipo, mas é influenciado em graus variáveis pelo ambiente (ver também plasticidade fenotípica). Além disso, vale lembrar que…

Ponto isoelétrico (pI): valor de pH onde a carga elétrica líquida da proteína é igual a zero. Neste pH a molécula é eletricamente neutra Eletroforese bidimensional (2D) Combinação da focalização isoelétrica com a eletroforese em SDS Western Blotting Imunodetecção de proteínas em membrana de nitrocelulose L11H L8D T5F T5C 198 T 131 83 scFv 40 31 L11H L8D T 5F T5C LT TL L T TL B10 B MM (A) (B) ELISA -…

obtidas. As pequenas colônias (que usualmente apresenta os recombinantes) foram colhidas e crescem em 2 ml de L-caldo contendo 50µg/ml de kanamicina. Clones foram primeiro avaliados pelos seus tamanhos como superenrolado no gel de agarose (Southem blotting), comparando os controles pAdEasy-1 ou pAdEasy-2. Esses clones que tem insertos foram novamente testados por digestão com enzimas de restrição, como PacI, SpeI e BamHI. As vezes as recombinações ocorrem entre a fração da sequência Ori…

técnica, de imediato, tomou o lugar da anterior, possibilitando o desenvolvimento de sequenciadores automáticos de DNA. O sequenciamento manual ainda existe, mas é muito mais trabalhoso, caro e arriscado, pois utilizam-se substâncias radioativas. Western blot é um método usado para detectar proteínas em um homogenato (células bem trituradas) ou um extrato de um tecido biológico. Essa técnica usa eletroforese em gel para separar as proteínas desnaturadas por massa. As proteínas são…