Lowry E Biureto

Muitos métodos espectrofotométricos, ao longo dos anos, têm sido propostos para a determinação de proteínas totais, mas não existe uma metodologia considerada de uso universal para todos os meios. Os métodos geralmente mais utilizados são o do biureto, de Lowry, do “Coomassie brilliant blue” BG-250 ou reagente de Bradford, do BCA ou reagente de Smith, e de absorção de proteínas no ultravioleta. A seguir serão discutidas as vantagens e desvantagens destas cinco metodologias.

sulfato, elementos metálicos em geral, As e B. 2- Métodos de determinação de proteínas totais -Sistema Colorimétrico: o reagente do biureto, uma solução de sulfato de cobre, citrato trissódico, carbonato de sódio, reage com as proteínas da amostra, formando um complexo corado de cor violeta, que é proporcional à concentração proteica da amostra. -Método de Lowry: A metodologia mais utilizada na determinação de proteínas. O principio do método baseia-se numa mistura contendo…

FOTOCOLORIMETRIA E ESPECTROCOLORIMETRIA: Fracionamento das proteínas do leite e sua dosagem pelo método do Biureto. 1. INTRODUÇÃO1.1. Métodos Fotocolorímetro A fotocolorimetria e a Espectrofotometria podem ser conceituadas como um procedimentoanalítico através do qual se determina a concentração de espécies químicas mediante a absorção deenergia radiante (luz).A fotocolorimetria é um método biofísico de análise de substâncias largamente utilizado emlaboratórios de análises clínicas e…

longo dos anos, muitos métodos espectrofotométricos, têm sido propostos para a determinação de proteínas totais, porém não existe uma metodologia considerada de uso universal para todos os meios. Os métodos geralmente mais utilizados são o do Biureto, de Lowry, de Bradford, de Smith e de absorção de proteínas no ultravioleta (Zaia et al., 1998): a) Método de Bradford Um procedimento simples para a determinação da concentração da proteína nas soluções é a técnica de Bradford que foi…

três experimentos de quantificação de proteínas, podemos dizer que o método de Lowry é sensível e preciso, com uma faixa de detecção de 10 a 1000 µgL/mL, porém é incompatível com detergentes e agentes redutores, além de ser um processo demorado. Enquanto isso, o método de Bradford é compatível com agentes redutores e rápido, detectando entre 20 a 2000 µg/mL, mas também é incompatível com detergentes. Já o método de Biureto não tem praticamente nenhuma compatibilidade com agentes…

e somente pequena quantidade( é proveniente de fontes não convencionais, que são aquelas advindas de microrganismos como bactérias e leveduras. Existem vários métodos para determinar proteínas em alimentos, como : presença das ligações peptídicas (método de Biureto), da capacidade de absorção UV (certos aminoácidos absorvem radiação UV), da presença de grupamentos aminos livre (método de Ninhidrina), da capacidade de ligação de corantes (métodos de…

pois todos apresentam limitações. A escolha baseia-se na natureza das proteínas e de outros componentes da amostra, no tempo da reação, na precisão desejada e na sensibilidade da análise. A seguir alguns métodos são citados: • Método do biureto: a reação ocorre em solução alcalina em presença de solução de sulfato de cobre diluída, ocorrendo a formação de um composto de cor púrpura. A cor deve-se à ligação do átomo de cobre com quatro átomos de nitrogênio das cadeias…

satisfatório, pois todos apresentam limitações. A escolha baseia-se na natureza das proteínas e de outros componentes da amostra, no tempo da reação, na precisão desejada e na sensibilidade da análise. A seguir alguns métodos são citados: • Método do biureto: a reação ocorre em solução alcalina em presença de solução de sulfato de cobre diluída, ocorrendo a formação de um composto de cor púrpura. A cor deve-se à ligação do átomo de cobre com quatro átomos de nitrogênio das cadeias…

onda. ii. Absorção no visível A absorção de uma solução de proteína pode ser medida na região do visível, tendo, para isso, que ser previamente tratada com algum reagente que confira cor. São exemplos desta metodologia: ii.1. Método do biureto O biureto obtém-se por aquecimento da ureia e tem a seguinte estrutura: Em meio alcalino, os iões Cu2+ provenientes do sulfato de cobre (CuSO4) complexam-se com os átomos de azoto das ligações peptídicas formando um complexo de cor…

Muitos métodos espectrofotométricos, ao longo dos anos, têm sido propostos para a determinação de proteínas totais, mas não existe uma metodologia considerada de uso universal para todos os meios. Os métodos geralmente mais utilizados são o do biureto, de Lowry, do “Coomassie Brilliant blue” BG-250 ou reagente de Bradford, do BCA ou reagente de Smith, e de absorção de proteínas no ultravioleta. A seguir serão discutidas as vantagens e desvantagens de uma dessas metodologias, que será a…