Separação de organelas e macromoléculas por centrifugação
ALUNOS: ANA AUGUSTA COELHO DA SILVA GABRIEL GADE LARISSA BARBOSA NATHALIA ARAUJO STEPHANE FERNANDES PEDRO HENRIQUE MATIAS LIMA
PROFA DRA NORA KATIA SAAVEDRA DEL AGUILA
INTRODUÇÃO E OBJETIVOS
A centrifugação é um processo dependente de uma força centrífuga, gerada pela rotação da amostra, que resulta na separação dessa amostra. Esse processo é usado para sedimentar sólido em líquidos, ou separando líquidos imiscíveis de diferentes densidades, em fases. Para ocorrer a centrifugação é indispensável a força centrífuga relativa (FCR). Essa força então, é gerada quando uma partícula ou conjunto de partículas passa a realizar um movimento circular.
Neste relatório será apresentado os materiais, métodos e passos do processo de separação de organelas e macromoléculas pelo processo de centrifugação, além dos resultados desse processo.
Pode-se encontrar diferentes tipos de centrífuga:
Centrífuga da bancada Centrífuga de clínica Micro centrífuga
MATERIAL E MÉTODOS
RESULTADOS E DISCUSSÃO Obtem-se como resultado da 1° etapa, uma solução de cor magenta:
A maceração é feita para se quebrar a parede celular e liberar as organelas em meio a solução. A cor é conseqüência do pigmento antocianina liberado juntamente com as outras organelas com a quebra da parede.
Após a primeira centrifugação em rotação de 8.000 RPM, tem-se uma solução avermelhada com precipitado. O corpo de fundo é formado pelo resto celular (as organelas), no sobrenadante a antocianina continua miscível na água acidulada, pois com sua densidade não é possível separar o pigmento por centrifugação.
Na 2° etapa, o detergente dissolve a membrana do cloroplasto, liberando a clorofila em meio à água acidulada. Realiza-se uma centrifugação em 8.00 RPM para separar a clorofila da solução.
Porém o