Resumo Histologia Básica

HISTOLOGIA – AULA 01

PREPARAÇÃO E TECIDOS PARA EXAME MICROSCÓPICO
(Microscópio de luz ou óptico ou fotônico)

1. Fixação = evitar a digestão dos tecidos por enzimas presentes nas próprias células (autólise)ou em bactérias. Preservar estrutura e composição molecular do tecido.

**Método químico = os tecidos são emersos em soluções desnaturantes que formará pontes com moléculas vizinhas (FIXADORES)

FIXADORES MAIS USADOS: a) formaldeído a 4% e b) glutaraldeído
TETRÓXIDO DE ÓSMIO: (OsO4): preservar e fornecer contraste aos lipídios e proteínas.

2. Inclusão = uso de parafina (microsc. de luz) ou resina (microsc. de luz e eletrônico).

**Procedido de duas etapas: desidratação* e clareamento.

*Banhos de etanol primeiramente com 70%, depois 80%, 90% e por fim 100%. Logo em seguida o etanol é substituído por xilol, que é miscível em etanol e em parafina. Finalmente é colocada a parafina quente (em torno de 56˚C~60˚C).

3. Coloração = o corante forma ligação eletrostática com os componentes dos tecidos.

Tecidos

Basófilos (ácidos nucléicos, glicosaminoglicanos) – Afinidade por corante básico, ex: azul-de-toluidina, azul-de-metileno, hematoxilina.

Acidófilos (mitocôndria, proteínas, citoplasma e colágeno) – afinidade por corante ácido, ex: eosina e fucsina ácida.

MICROSCOPIA DE CONTRASTE DE FASE – é baseada no fato de que a luz muda sua velocidade ao atravessar estruturas celulares e extracelulares que tenham índices de refração diferentes. Uma ferramenta poderosa para observar células vivas.
MICROSCOPIA DE CONTRASTE DIFERENCIAL – (de Nomarski) produz uma imagem aparentemente tridimensional.
MICROSCOPIA DE POLARIZAÇÃO – a luz passa de um filtro polarizador (com um Nicol ou um filtro Polaroid) e sai vibrando em uma só direção. Um segundo filtro colocado com seu eixo perpendicular ao primeiro, bloqueará a passagem de luz.
MICROSCOPIA CONFOCAL – torna possível focar um objeto muito delgado. O espécime é iluminado por um feixe de luz