Relatório Microbiologia
Curso de Engenharia de Alimentos
Microbiologia de Alimentos/ 2013.2 – CAL5403
Docente: Dra. Deise H. Baggio Ribeiro
Discentes: Guilherme E. De Lima, Johanna Lueders e Mariana Cargnin.
CONTAGEM DE STAPHYLOCOCCUS
1. OBJETIVO
Definir o procedimento para a contagem de Staphylococcus aureus e de Estafilococos coagulase positiva em alimentos.
2. PRINCÍPIO Baseia-se na inoculação das diluições desejadas das amostras sob teste, em ágar Baird Parker, cuja composição evidencia a habilidade deste microorganismo de crescer na presença 7,5 ou 10% NaCl, 0,01 a 0,05% de telurito de potássio, 0,2 a 0,5% de cloreto de lítio, 0,12 a 1,26% de glicina ou 40 mg/mL de polimixina.
O Staphylococcus aureus reduz anaeróbia e aerobicamente o telurito de potássio, produzindo colônias negras. O ágar Baird Parker, enriquecido com solução de gema de ovo, possibilita a visualização da hidrolize da gema do ovo, por atividades proteolíticas e lipolíticas do Staphylococcus aureus, respectivamente, através do aparecimento de um halo de precipitação e um de clarificação ao redor da colônia.
2.1 PROVA DA COAGULASE
Capacidade de coagular o plasma pela ação da enzima coagulase. O teste apresenta limitações para a contagem de S.aureus, tendo em vista que algumas espécies de Staphylococcus relacionadas a animais também são coagulases positivas.
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2.2 PROVAS COMPLEMENTARES
prova da termonuclease e a prova da catalase.
3. MATERIAL
3.1 VIDRARIA E OUTROS
Alça de Drigalski
Material de pesagem (béquer de 100 mL e 1000 mL, sacos estéreis de stomacher, bag clip.)
Tubos de diluição: 2 a 3 tubos 20 X 24 cm com 9,0 mL de água peptonada 0,1%
Béquer 50 ou 100 mL
Pipeta automática de 1000 e 100 µL
Ponteiras descartáveis com e sem barreira de 1000 e 100 µL
Descarte para pipetas e ponteiras com solução com 2% de hipoclorito de sódio e 5 % de detergente neutro.
3.2 EQUIPAMENTOS
Balança Analítica
Bag Mixer