Relatório de aula prática de bioquímica
RELATÓRIO DA AULA PRÁTICA DE ESPECTROFOTOMETRIA
Discente: Amanda Sara Cavalcante Souza
Docente: Carlos Eduardo
Curso: Medicina
Turma: 1º ano A
Goiânia, maio de 2012. 1. Introdução
A espectrofotometria é o método de análises óptico mais usado nas investigações biológicas e físico-químicas. O espectrofotômetro é um instrumento que permite comparar a radiação absorvida ou transmitida por uma solução que contém uma quantidade desconhecida de soluto e uma quantidade conhecida da mesma substância.
Com o uso do espectrofotômetro determinamos a transmitância e a absorbância de soluções de metilorange e de azul de bromofenol, o espectro de absorção e transmitância das soluções envolvidas. 2. Objetivo
* Determinar o espectro de absorção de soluções de metilorange (MO) e de azul de bromofenol (ABF) e construir uma tabela e um gráfico para a solução de metilorange. * Caracterizar o comprimento de onda onde ocorre a absorção máxima. * Construir uma curva padrão para o corante metilorange no comprimento de onda mais adequado.
3. Material e métodos
4.1. Procedimento 1
No espectrofotômetro utilizou-se a água destilada para calibrar o aparelho em absorbância igual a zero antes de cada medição. Em seguida, com o aparelho mediu-se a absorbância das soluções de metilorange em concentração 0,01 mg/ml e do azul de bromofenol em 0,01 mg/ml nos comprimentos de onda 415, 445, 460, 490, 520, 535, 550, 580, 610, 640 em nanômetros. Por último, construiu-se uma tabela e um gráfico da transmitância X comprimento de onda para o metilorange no papel milimetrado. 4.2. Procedimento 2
Com o uso de uma pipeta graduada e 6 tubos de ensaio marcados como: B, 1, 2, 3, 4 e 5. Adicionamos 5,0 ml de água destilada no tubo B; 1,0 ml de MO (0,01 mg/ml) e 4,0 ml de água destilada no tubo 1; 2,0 ml de MO e 3,0 ml de água destilada no tubo 2; 3,0 ml de MO e 2,0 ml de água destilada no tubo 3; 4,0 ml de MO e 1,0 ml de água