relatorio

A doença de Chagas é uma infecção parasitária causada pelo protozoário Trypanosoma cruzi. Na maioria dos casos a doença evolui até a fase crônica. O diagnóstico de laboratório depende do estágio no qual se encontra a doença. Durante a fase aguda, o diagnóstico se efetua mediante a comprovação dos parasitos no sangue. Durante a fase crônica, utilizam-se métodos sorológicos para detecção de anticorpos contra o Trypanosoma no sangue.
Vários são os métodos utilizados para o diagnóstico da doença de Chagas: reação de fixação de complemento, aglutinação, precipitação, imunofluorescência, hemaglutinação e imunoenzimático. No teste de hemaglutinação, hemácias previamente sensibilizadas com componentes do protozoário são colocadas em contato com o soro teste e, havendo anticorpos contra esses componentes (paciente com a doença), ocorrerá a aglutinação dessas hemácias. Essa técnica tem recebido especial atenção devido à sua facilidade de execução, alta sensibilidade e reprodutibilidade. 2. OBJETIVO
Determinar a presença de anticorpos anti T. cruzi em amostras de soro para diagnóstico da doença de Chagas por meio da técnica de hemaglutinação. 3. MATERIAL NECESSÁRIO
• Tubos de ensaio para diluição e titulação
• Pipetas sorológicas
• Estante para tubos e rack de ponteiras
• Recipiente para descarte de material.
• Suspensão de hemácias sensibilizadas com componentes do Trypanosoma cruzi
• Solução diluente
• 2-Mercaptoetanol
• Soro controle positivo
• Soro controle negativo
• Placa de microtitulação descartável com fundo em “V” 4. PROCEDIMENTOS TÉCNICOS
1- Preparou-se a solução diluente. Solução diluente: Foi colocado em um tubo de ensaio 70 ml de 2-mercaptoetanol para 10 ml da solução diluente. A solução diluente com 2-mercaptoetanol é usada para diluir as amostras do soro.
2- Foram diluídos, em um tubo de ensaio, 10μl da amostra com 310 μl do diluente (diluição 1/32).
3- Pipetou-se 50 μl da amostra diluída anteriormente (1/32) na primeira cavidade da