Relatorio Microbiologia- coloração Gram
Coloração de Gram, que recebeu este nome em homenagem ao médico dinamarquês Hans Cristian Joaquim Gram é uma técnica de coloração para diferenciação de microorganismos através das cores, para serem observados em microscópio óptico. Após a técnica que consiste em aplicar colorante roxo, fixá-lo, passar por alcool-cetona e aplicar corante rosa, as que ficarem roxas são classificadas como gram positivas e as rosas como gram negativas. As Gram-positivas possuem uma espessa camada de peptideoglicano e ácido teicóico, e as Gram-negativas, uma fina camada de peptideoglicano, onde se encontra uma camada de lipoproteínas, fosfolipídeos, proteínas e lipopolissacarídeos. Durante o processo de coloração, o álcool-cetona extrai os lipídeos, resultando em uma porosidade ou permeabilidade maior da parede celular das bactérias Gram-negativas, assim, o corante violeta (CVI) pode ser retirado e as bactérias Gram-negativas são descoradas. Já as bactérias gram-positivas, pela sua composição diferente, torna-se desidratada durante o tratamento com álcool-acetona, a porosidade diminui, a permeabilidade é reduzida e o complexo CVI não pode ser extraído. A coloração de Gram é um dos mais importantes métodos de coloração utilizados em laboratórios de microbiologia e de análises clínicas, sendo quase sempre o primeiro passo para a caracterização de amostras de bactérias, pois esta diferença de comportamento é atribuída a diferenças na composição da parede celular. Este experimento teve como objetivo demonstrar a importância da coloração de Gram e estabelecer a distinção entre celulas Gram-positivas e Gram-negativas.
Procedimento
Materiais:
Lâmina de vidro
Alça bacteriológica
Bico de Bunsen
Solução álcool areia
Álcool cetona
Microscópio óptico
Conta gotas
Água destilada
Bactérias gram-positivas e gram-negativas (Salmonella, Bacilos e achados na mucosa bucal)
Cristal Violeta
Fucsina
Pinça metálica
Grade metalica
Lugol
Método: Os