Relatorio atividade enzimatica

DISCIPLINA DE BIOQUIMICA
RELATÓRIO ENZIMAS

INTRODUÇÃO
As enzimas apresentam uma capacidade de reagir com determinadas partes das células, denominados substratos, formando complexos, ou mesmo ligações covalentes denominadas atividade biológica. Essa atividade vai depender do número de cadeias peptídicas e arranjos.
A determinação da atividade enzimática envolve a medida da velocidade da reação com a enzima pura e com condições que permita que a velocidade seja máxima. Essa velocidade faria com fatores diversos tais como: concentração de enzima ou de substrato temperatura e pH.
OBJSTIVO
Comparar a atividade enzimática catalise em relação à temperatura, pH e concentração na presença do substrato.
MATERIAIS E METODOS
COLETA DA ENZIMA
Primeiramente em um copo descartável foi coletada 1,5ml de saliva de um integrante do grupo. Após a coleta, a saliva foi diluída na proporção de 1:4 com o tampão fosfato pH 6.8 e foi reservada.
CARACTERIZAÇÃO DE PADRÕES Foram necessários 2 tubos de ensaio numerados de A e B. No tubo A foi colocado com a pipeta volumétrica 2ml de amido e duas gotas do reativo de lugol (padrão de não hidrólise) e no tubo B, 2ml de glicose e duas gotas do reativo de lugol (padrão de hidrólise total). Esses foram homogeneizados e reservados para comparação com a análise das outras amostras descritas a seguir.
AVALIAÇÃO DO EFEITO DO pH NA ATIVIDADE ENZIMÁTICA Foram necessários 3 tubos de ensaio indicados em C, D e E. No tubo C com o auxilio da pipeta volumétrica foi colocado 2ml de amido, 2ml de tampão fosfato e 500µL da saliva diluída. No tubo D, foi colocado 2ml de amido, 2ml de HCl e 500µL da saliva diluída. No tubo E foi colocado 2ml de amido, 2ml de NaOH e 500µL da saliva diluída. Os 3 tubos foram levados ao banho-maria na temperatura de 37°C por 20 minutos. Após o tempo esperado foram retirados do banho-maria e adicionado imediatamente 2 gotas do reativo lugol. Foi agitado e observado sua coloração com as