Prática de bioquímica

Universidade Federal de Santa Catarina.
Centro de Ciências Biológicas.
Ciências Biológicas/Licenciatura Noturno.

Relatório de aula prática 08/04/2011
Reações de caracterização de proteínas

Introdução
Os experimentos realizados nos mostrou as reações com diferentes tipos de reagentes e métodos com as proteínas.

Objetivos:
-Mostrar por reações de precipitação, o efeito de força iônica sobre a solubilidade das proteínas;
-Demonstrar o efeito de diversos agentes desnaturantes sobre as proteínas em soluções testes;
-Determinar o ponto isoelétrico da caseína;
-Demonstrar uma curva padrão das proteínas, utilizando a metodologia do ácido bicinconínico ( BCA )
Material e Métodos
1-Desnaturação por ação do calor:
Em um tubo de ensaio foi adicionado 20 gotas da solução de ovoalbumina e aquecido a cerca de 85 °C.
2- Desnaturação por ácidos e álcalis fortes:
Foi utilizado 2 tubos de ensaio e adicionado em cada tubo 20 gotas da solução de ovoalbumina, no tubo 1 acrescentado mais 20 gotas de HNO3 concentrado e no tubo 2 mais 20 gotas de NaOH 12N.
3- Desnaturação por reação com reagentes alcaloides:
Foi utilizado 1 tubo de ensaio e adicionado 20 gotas de solução de ovoalbumina, 2 a 3 gotas ( gota a gota ) da solução de ácido tricloroacético 10 % até o aparecimento de um preciptado branco, os resultados foram observados e adicionado gota a gota da solução de NaOH 12N e agitado com cuidado.
4- Desnaturação por ação de solventes orgânicos:
Foi utilizado 2 tubos de ensaio, no tubo 1 foi adicionado 20 gotas de acetona e 20 gotas de butanol no tubo 2, em cada tubo foi adicionado mais 20 gotas da solução de ovoalbumina e foi homogeneizado
5- Determinação do ponto isoelétrico da caseína:
Foi utilizado 5 tubos de ensaio e em cada um deles foi adicionado a quantidade de água destilada referente na tabela abaixo medida pela pipeta e uma medida de acido acético diferente, também medida pela pipeta.

N° dos tubos
1
2
3
4
5