Aula Prática de Bioquímica
01) A utilização da reação do biureto é responsável por verificar a presença de proteína na solução analisada, detectando ligações peptídicas entre três ou mais resíduos de aminoácidos, formando peptídeos, proteínas ou outras substâncias que apresentem dois grupos carbamínicos ligados diretamente, ou por meio de um átomo de carbono ou nitrogênio. A adição de NaOH em solução é responsável por provocar um desarranjo na proteína, assim como o cátion cúprico em solução, originário do sulfato de cobre, o qual interage com os nitrogênios expostos pela cadeia polipeptídica, formando um complexo púrpura.
02) As reações de coloração são importantes para determinação de proteínas, e desta maneira, caracterizar certas propriedades da proteína identificada, pois a intensidade da coloração permite a previsão da extensão da cadeia polipeptídica.
03) A precipitação da solução proteica por sais de metais pesados é mais eficiente em meios relativamente alcalinos, isto é, em valores de pH superiores ao pI das proteínas, pois assim as cadeias laterais estarão desprotonadas, e algumas com cargas negativas, atrairão os cátions de metal pesado, formando proteinatos insolúveis (desnaturação).
No caso da precipitação por reagentes dos alcaloides, a maior eficiência é encontrada quando as proteínas estão protonadas (menor valor de pH- abaixo do pI), ou seja, positivamente carregadas (carga líquida positiva), interagindo com os ânions alcaloides; ocorrerá a desnaturação e a formação de um precipitado insolúvel.
4) O “salting in” ocorre quando se acrescenta baixa concentração de sais à solução proteica. Dessa forma, os íons salinos interagem com as cargas iônicas proteicas, reduzindo as interações entre as proteínas, fazendo com que elas se dissolvam melhor em água.
O “salting out” é quando se acrescenta altas concentrações de sais. Dessa forma, os íons salinos interagem com a água no meio, fazendo com que menos água esteja disponível para