Metologia

Coleta de sangue e determinação dos parâmetros fisiológicos

Para analise dos parâmetros sanguíneos, serão coletadas amostras de sangue de 10 peixes no início do experimento, formando a minha amostragem basal, e de 6 peixes de cada unidade experimental , totalizando 72 peixes ao final de 60 dias. Essas coletas serão realizadas com a ausência do uso de anestésicos, devido a sensibilidade dos peixes a esses agentes farmacológicos, dessa forma a coleta sanguínea será realizada de forma rápida, para evitar o estresse dos peixes as condições de manejo e experimentais. As amostras de sangue serão coletadas através da punção do vaso caudal utilizando seringas de 3 ml e agulhas de 27 Gx ½, com o anticoagulante EDTA 10% (ácido etilenoiaminotetra acético) e armazenadas em tudo de eppendorf de 2 ml, submetidas a posterior processo de refrigeração. As quais serão destinadas à determinação das seguintes análises a partir do sangue total: contagem total de leucócitos (Leucometria global), hematócrito (Ht), concentração de hemoglobina (Hb), contagem de eritrócitos (RBC) e leucócitos (WBC), volume corpuscular médio (VCM) e concentração de hemoglobina corpuscular média (CHCM), obtidas através do sangue total; e a partir do plasma sanguíneo serão realizadas as seguintes analises: glicose plasmática, colesterol e triglicérides proteínas plasmáticas totais e cortisol.

Contagem dos leucócitos (WBC)

A análise referente à determinação da contagem de leucócitos será feita utilizando-se as extensões sanguíneas, que após serem coradas pelo método de coloração rápida May Grünwald-Giemsa Wright (MGGW) (Tavares-Dias et al., 2002; Tavares-Dias & Moraes, 2002), e com o auxilio do microscópio óptico, podem ser contados, assumindo valores em numero de leucócito/ µL

Determinações do hematócrito (Ht%).

O hematócrito será determinado pelo método de microhematócrito, em tubos capilares heparinizado, com 75 mm de comprimento e 1,0 mm de diâmetro interno e 1,5 mm