HPLC

ANDRÉ RAMOS
DOUGLAS ARRUDA
IVAN TAIATELE JUNIOR
MARIANA MUNHOZ LARINI

CROMATOGRAFIA LÍQUIDA DE ALTA EFICIÊNCIA
(HPLC)

Londrina
2015

1.

HISTÓRICO DA HPLC
A cromatografia líquida foi definida por volta de 1900 pelo trabalho do botânico

russo, Mikhail S. Tswett.
Os seus estudos pioneiros focaram-se em separar compostos extraídos de plantas, (pigmentos da folha), utilizando um solvente, numa coluna empacotada com partículas. Para realizar isso Tswett encheu uma coluna de vidro com partículas de dois materiais específicos que ele achou útil, a matriz da coluna dele foi feita com pó de giz (carbonato de cálcio) e alumina (oxido de alumínio). Ele derramou a sua amostra
[homogeneizado de folhas apos extração por solvente] na coluna e continuamente adicionou solvente puro. À medida que a amostra passou através da coluna por gravidade, diferentes faixas coloridas puderam ser vistas, pois alguns componentes foram-se movimentando mais rápido do que os outros. Ele relatou que variadas faixas de cores diferentes surgiam na amostra, e que isto devia ocorrer porque existiam diferentes compostos contidos na amostra. Ele tinha criado então uma separação analítica destes compostos com base na força de atracão química diferente de cada composto para as partículas. Os compostos que foram mais fortemente atraídos para as partículas da matriz da coluna diminuíram a velocidade de eluição , ao passo que outros compostos mais fortemente atraído ao solvente moveram-se mais rapidamente. Este processo pode ser descrito da seguinte maneira:. Os compostos contidos na amostra distribuíram-se de forma diferente entre o solvente, chamado de fase móvel, e as partículas da coluna, chamada a fase estacionária. Isto fez com que cada um dos compostos se move-se a uma velocidade diferente, criando assim, uma separação dos compostos.
Tswett cunhou o nome da cromatografia

[do chroma palavra grega que

significa cor e grafia o que significa escrita, literalmente a tradução seria textos em cor] para