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Aula Prática Bioquímica

Aluno(a): Data:
Professora: Nádia Helena Garofo Aula nº:

Titulo: Determinação Colorimétrica do pH e Comprovação do Efeito Tampão

Objetivo

Verificar as alterações de pH. Conceituar solução tampão. Reconhecer a importância da manutenção do pH nos líquidos biológicos. Verificar os fatores que determinam a eficiência ou capacidade de uma solução tamponada.

Reativos

- Tampões de pH: 3,0; 4,0; 5,0; 6,0; 7,0; 8,0; 9,0; 10,0. - Indicador Universal (*) - Hidróxido de sódio 0,1N - Ácido clorídrico 0,1N - Tampão fosfato 0,1N, pH 7,0

Procedimento

1- Prepare uma bateria com oito tubos de ensaio. Adicionar ao primeiro tubo 1,0 ml de solução tampão pH 3,0 , no segundo tubo 1,0 ml da solução tampão pH 4,0 e assim sucessivamente até o tampão pH 10,0. Adicionar a cada tubo cinco gotas de indicador universal e 9,0 ml de água destilada. Esta bateria irá construir sua escala cromática de pH.

2- Prepare outra bateria com quatro tubos de ensaio e numere-os de 1 a 4. Adicione cinco gotas de indicador universal a cada tubo.

3- Aos tubos 1 e 3 adicione 10,0 ml de água destilada. Aos tubos 2 e 4 1,0 ml de solução tampão pH 7,0 seguido de 9,0 ml de água destilada. Agite.

4- Adicione uma gota de NaOH aos tubos 1 e 2. Agite.observe e explique.

5- Com uma pipeta sopre ar expirado através da solução do tubo 1 por 15 segundos. Observe as mudanças de coloração. Determine o pH. Explique.

6- Sopre o tubo 2 por um minuto. Observe e explique.

7- Adicione aos tubos 3 e 4 duas gotas de HCl 0,1N. Agite. Observe a mudança de coloração e anote o pH.

8- Continue a adição de HCl 0,1 N no tubo 4, gota a gota, agitando-o. Determine quantas gotas ou ml de HCl devem ser adicionadas até que se obtenha a mesma coloração do tubo