Farmacêutica

OBJETIVOS
Familiarizar-se com o preparo de meios de cultivo em laboratório, além dos procedimentos de inoculação em meio sólido e meio líquido;
Aprender a técnica de diluição seriada e a contagem microbiana por UFC em meio sólidos contendo diferentes diluições;
Aprender a técnica de isolamento de micro-organismos por estrias em meio sólido;
Aprender técnicas de cultivo, armazenamento e/ou reativação de culturas microbiana em meios sólido e líquido.

PROCEDIMENTO - PARTE A - Inoculação e contagem microbiana (UFC)
a) Inoculou-se amostras de solo (cana de açucar) e pesou-se 1,0 g da mesma;
A amostra foi então transferida para o erlenmeyer contendo 100 mL de solução salina 0,85 % de
NaCl estéril;
Tampou-se o erlenmeyer, mantendo uma agitação suave em movimentos de rotação por alguns minutos; Retirou-se uma alíquota de 1,0 mL da solução água-solo com uma pipeta estéril e adicionou-se em
9,0 mL de solução salina 0,85 % de NaCl estéril (tubo 10^-1);
Retirou-se uma nova alíquota de 0,1 mL da solução água-solo com uma pipeta estéril e adicionou-se em 9,0 mL de solução salina 0,85 % de NaCl estéril (tubo 10^-3) e repetiu-se o procedimento para o tubo 10^-5 (diluição seriada de amostras);

Com o auxílio de uma pipeta estéril, 1,0mL da diluição 10^-1 foi transferido para a superfície de uma placa de Petri com meio de cultura sólido – Ágar Nutriente, denominada como solo 10^-1- e realizou-se a distribuição da amostra transferida por toda a placa com o meio de cultura;

O procedimento foi realizado em duplicata (2 placas por diluição);
O mesmo procedimento foi realizado para as diluições 10^-3 e 10^-5 entretanto utilizando novas pipetas; As placas foram então incubadas a 30ºC, por um período de 24 a 48 horas em estufa;
Após a incubação, realizou-se a contagem das Unidades Formadoras de Colônias (UFC) para as três diluições realizadas.

PARTE B- Isolamento microbiano por estrias
Retirou-se a tampa do tubo contendo diluição 10^-1 e introduziu-se a