Extração do DNA animal e vegetal

COMPLEXO EDUCACIONAL FMU - CURSO: Ciências Biológicas

ANDERSON NOBRE DOS SANTOS

ROTEIRO DE AULA PRÁTICA - Genética - Profa. Tânia Borba
AULAS 2 e 3 - Extração do DNA - animal e vegetal

São Joaquim -Liberdade
09/2015

Objetivo: Demonstrar através de um método simplificado como podemos obter DNA para estudos.
A extração de DNA de células eucariontes consta fundamentalmente de três etapas:
a) ruptura das células para liberação dos núcleos
b) desmembramento da cromatina em seus componentes básicos, DNA e proteínas
c) separação do DNA dos demais componentes celulares

Matérias para isolamento de DNA genômico da mucosa bucal
a) Sal doméstico
b) Colher de chá
c) Copo descartável
d) Tubos Falcon de 15 mL
e) Água
f) Álcool 70% deixado previamente no congelador
Procedimentos
a)Coloque duas colheres (chá)de sal em um copo de água mexendo bem até dissolver completamente b) Colocar dentro da boca uma boa quantidade da solução salina preparada e fazer movimentos de bochechos por aproximadamente 5 minutos;
c) Passado esse tempo despeje cerca de 5 ml em um tubo Falcon de 15 ml;
d) Adicionar ao obtido quantidade igual de álcool 70% gelado, deixando-o escorrer vagarosamente pela borda. Imediatamente, formam-se duas fases, sendo que fios esbranquiçados, que são aglomerados de moléculas de DNA, torna-se visíveis na fase superior.
e) Coletar esse fios com auxílio de uma micropipeta de ponta fina através de movimentos circulares vagarosos na fase superior

Matérias para isolamento de DNA vegetal (kiwi ou morango)
a) Sal doméstico
b) Colher de chá
c) Copo tipo americano
d) Detergente de cozinha
e) Água
f) Metade da fruta usada
g) Coador de papel
h) Tubo tipo Falcon de 15 ml
i) Álcool 70% deixado previamente no congelador
j) Micropipeta de ponta fina
k) Microscópio
l) Lâminas e lamínulas
m) Corante básico azul de metileno

Procedimentos
a) Dissolver 2 pitadas de sal e uma colher de (chá) de detergente, misturando bem até dissolver completamente; b) Adicionar metade da fruta usada sem