Espectrofotometria

Espectrofotometria
Introdução
A espectrofotometria pode ser definida como toda técnica analítica que usa a luz para medir as concentrações das soluções, através da interação da luz com a matéria.
O conhecimento da absorção de luz pela matéria é a forma mais usual de determinar a concentração de compostos presentes em solução. A maioria dos métodos utilizados em bioquímica clínica envolve a determinação espectrofotométrica de compostos corados (cromóforo) obtidos pela reação entre o composto a ser analisado e o reagente (reagente cromogênico), originando um produto colorido. Os métodos que se baseiam nesse princípio são denominados métodos colorimétricos, os quais geralmente são específicos e muito sensíveis. A grande vantagem em utilizar compostos coloridos deve-se ao fato de eles absorverem luz visível (região visível do espectro eletromagnético).
A espectrofotometria — medida de absorção ou transmissão de luz — é uma das mais valiosas técnicas analíticas amplamente utilizadas em laboratórios de área básica, bem como em análises clínicas. Por meio da espectrofotometria, componentes desconhecidos de uma solução podem ser identificados por seus espectros característicos ao ultravioleta, visível, ou infravermelho.

Objetivo
Verificar a finalidade e utilização na prática laboratorial da determinação do espectro de absorção e transmissão e estudar o procedimento para confeccionar uma curva padrão.

Materiais utilizados
Tubos de ensaio
Estante
Pipetas
Espectrofotômetro e cubetas
Água destilada
Solução de Permanganato de Potássio 0,10 g/L
Procedimento
1 – Preparo da solução
Pesou-se 0,1g de Permanganato de Potássio (KMnO4)
Colocou-se o KMnO4 em um béquer e dissolveu-se o conteúdo em aproximadamente 500mL de água destilada com o auxílio de um bastão de vidro.
Transferiu-se para um balão volumétrico de 1000mL e completou-se o volume.
2 – Tubo Branco
Água destilada (2mL)
3 – Procedimentos gerais de ajuste do fotômetro
Ligou-se o aparelho
Selecionou-se o comprimento de