Determinação de teor de fósforo inorgânico no soro sanguíneo
Licenciatura em Análises Clínicas e Saúde Pública
Química Aplicada
Determinação de teor de fósforo inorgânico no soro sanguíneo
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Índice
Introdução
A espectrofotometria consiste num método de análises óptico mais usado nas investigações biológicas e físico-químicas. O instrumento usado na espectroscopia UV/VIS é chamado de espectrofotómetro. Para se obter informação sobre a absorção de uma amostra, ela é inserida no caminho óptico do aparelho. Então, luz UV e/ou visível em um certo comprimento de onda (ou uma faixa de comprimentos de ondas) é passada pela amostra. O espectrofotómetro mede o quanto de luz foi absorvida pela amostra. A intensidade da luz antes de passar pela amostra é simbolizada por I0, e a intensidade da luz depois de passar pela amostra é simbolizada por I. A transmitância da amostra é definida pela razão (I/I0), a qual normalmente é expressa em percentagem de transmitância (%T). A partir dessa informação, a absorvância de ambos é determinada para esse certo comprimento de onda ou como uma função de uma faixa de comprimentos de onda. Os espectrofotómetros mais sofisticados normalmente fazem isso automaticamente. Existem dois tipos de espectrofotómetros: de feixe simples e de feixe duplo.
A cor das substâncias deve-se a absorção (transmitancia) de certos comprimentos de onda da luz branca que incide sobre elas, deixando transmitir aos nossos olhos apenas aqueles comprimentos de ondas não absorvidos.[1]
Apesar de as amostras poderem ser sólidas (ou mesmo gasosas), estas usualmente estão no estado liquido. Uma célula transparente (ou seja, que não absorve radiação na faixa de comprimentos de onda usada), normalmente denominada cuvete, é enchida com a amostra líquida e inserida no espectrofotómetro. O caminho óptico ( L) percorrido é então a largura da