Desamina O Da Fenilalanina
2014/15
PROVAS
QUÍMICAS
Desaminação da Fenilalanina
Patrícia Marques
P2
A fenilalanina (C9H11NO2) é um aminoácido que existe na maioria das proteínas vegetais e animais.
A desaminase da fenilalanina é uma enzima presente em algumas bactérias.
Catalisa uma desaminação
Remoção do grupo amina da fenilalanina e sua libertação como amónia
Reação no tubo, na presença da enzima desaminase da fenilalanina:
A partir da desaminação da fenilalanina do meio, há produção de ácidos orgânicos
(ácido fenilpirúvico), amónia e água.
Utilizados por alguns géneros de bactérias (Proteus,
Morganella, Providencia) em reações de biossíntese
Em bactérias que desaminam a fenilalanina oxidativamente, quando se adiciona o reagente cloreto de ferro ao meio, este reage com o ácido fenilpirúvico, formando um composto verde.
Composição química do meio p
H
f n al
7,
3
±
0,
2
a
2
5⁰
C
Fenilalanina Agar
Procedimento:
Agar
12g/
L
Água Destilada
1L
Extrato de
Levedura
3g/L
Cloreto de Sódio
5g/L
Difosfato de
Sódio
1g/L
DL – fenilalanina
2g/L
ou L –
Aplicações
Práticas: fenilalanina 1g/L
Diferenciar Géneros de bactérias na família
Enterobacteriaceae.
1) Inocular o meio em rampa, usando a técnica asséptica, através de uma estria à superfície com a amostra da respetiva bactéria.
2) Incubar em aerobiose, a 35 ± 2ºC durante18-24h. 3) Adicionar 3 - 5 gotas de solução aquosa de cloreto de ferro (FeCl3) a10%.
4) Agitar lentamente.
5) Ler a reação dentro de 5min.
Características do meio • Meio sólido
• Diferencial
• Em rampa
• Tons amarelo torrado
Bactérias que produzem a desaminase da fenilalanina Bactérias que produzem a desaminase da fenilalanina Há desaminação da fenilalanina Não há desaminação da fenilalanina + FeCl3
produze m Ácido Fenilpirúvico
Não há alteração de cor + FeCl3
Formação de um complexo verde
Fig. 1 – Reação positiva à esquerda e negativa á direita. Exemplos
Género: Morganella, Proteus, Providencia
Espécies: