contagem de celulas

PRÁTICA 5

CONTAGEM DO NÚMERO DE CÉLULAS VIÁVEIS POR PLAQUEAMENTO

INTRODUÇÃO:
Práticas laboratoriais são utilizadas comumente para contagem de microrganismos presentes em uma determinada amostra. Dentre essas práticas, destacamos a técnicas de espalhamento em superfície (“spread-plate”). Essa técnica consiste em sucessivas diluições da amostra, e que em cada diluição é espalhada em duas placas de Petri contendo meio de cultura 0,1 ml da amostra. Serve tanto para o isolamento quanto para contagem de microrganismos.
Após o plaqueamento e incubação, por tempo e temperatura adequados, as células ou pequenos agrupamentos vão crescer isoladamente, dando origem a colônias que serão contadas na diluição apropriada e, portanto, chamadas de unidades formadoras de colônia (UFC).
O ideal é que cada placa escolhida para contagem contenha um número considerado significativo no método em questão, o que para bactérias em geral seria de 30 a 300 colônias. Para que os resultados obtidos sejam estatisticamente válidos, faz-se a duplicata de placas para cada diluição. Após os cálculos adequados, levando-se em conta diluição e volume, é possível determinar a quantidade de microrganismos presentes em determinado peso ou volume do material inicial.

OBJETIVO:
Treinamento da técnica “Spread- Plate” na contagem de microrganismos em meio sólido, por plaqueamento da superfície.

RESULTADOS:
CALCULOS:
Contagem de colônias:
Diluição
R1 = 97
R2 = 264

Nos tubos muito diluídos a concentração das células é menor, ao mesmo tempo em que nos tubos muito concentrados há um excesso de células, e assim sendo não seria possível se fazer uma contagem adequada nas respectivas placas.

CONCLUSÃO:
Após a visualização dos resultados da prática, pode-se concluir que os dois métodos seriam eficazes para a contagem de colônias bacterianas. Porém, isso não foi possível em nosso experimento, pois as soluções utilizadas ainda possuíam altas concentrações de bactérias, sendo