Coloração de gram
Instituto Superior de Engenharia
CET- Segurança e Higiene Alimentar
Unidade de formação: Comunicação e Relações Interpessoais
1º Semestre
Ano lectivo 2012/2013
Relatório de Coloração de Gram
Realizado por: Carla nº46333
Índice
Resumo O método de coloração de Gram consiste no tratamento de uma amostra de uma cultura bacteriana crescida em meio sólido ou líquido, com um corante primário, o cristal violeta, seguido de um tratamento com um fixador, o lugol. Tanto bactérias Gram-positivas quanto Gram-negativas absorvem de maneira idêntica o corante primário e o fixador, adquirindo uma coloração violeta devido à formação de um complexo cristal violeta-iodo, insolúvel, em seus citoplasmas. Segue-se um tratamento com um solvente orgânico, o etanol-acetona.
Introdução Coloração de Gram A coloração de Gram foi desenvolvida em 1884 por Christian Gram, médico bacteriologista dinamarquês. A coloração de Gram e um procedimento de coloração diferencial, pois não cora todos os tipos de células igualmente. A coloração de Gram tem um grande significado taxonómico pois permite dividir as bactérias em 2 grupos: Gram positivas e Gram negativa. As bactérias Gram positivas tomam a cor roxeada, conferida pelo corante primário (cristal de violeta) e as Gram negativas coram de vermelho (fucsina básica). Consiste no tratamento sucessivo do esfregaço bacteriano, fixado pelo calor, com os reagentes cristal violeta, iodo, etanol - acetona e fucsina básica.
A técnica de Gram é uma forma rápida e fácil de avaliar a estrutura da parede celular bacteriana. As paredes celulares das bactérias Gram-positivo são estruturalmente diferentes das de Gram-negativo. As células Gram-positivo apresentam uma camada de peptidoglicano mais espessa, enquanto nas bactérias Gram-negativo, a camada é mais fina e apresenta uma membrana externa.
Materiais e Métodos
Durante esta prática utilizaram-se os seguintes