coloração de gram

UNIP ALPHAVILLE

CURSO : FARMÁCIA

COLORAÇÃO DE GRAM

Jhenifer

Introdução Proposta por C. Gram em 1884, esta técnica permite distinguir células bacterianas quanto à composição das suas paredes celulares, facilitando a observação morfológica das próprias células. Em termos físico-químicos, o processo baseia-se na reação de um corante alcalino com os ácidos da célula. Por adição de lugol (solução de iodo) forma-se um complexo que, quando se aplica o álcool, desaparece ou é retido, consoante a diferente sensibilidade das paredes celulares. Torna-se assim possível distinguir entre bactérias Gram positivas (Gram +) e Gram negativas (Gram -), consoante a cor final que as células tomam. Esta coloração é um dos critérios fundamentais usados em taxonomia bacteriana, pois esta diferença de comportamento é atribuída a diferenças na composição da parede celular.

Objetivo Demonstrar a importância da coloração de Gram e estabelecer a distinção entre Bactérias Gram-positivas e Gram-negativas;

Materiais Água , Álcool , Cristal violeta , Lugol , Safranina , Alça de Platina , Lâminas de vidro , Pipetas de Pasteur , Suporte para coloração das lâminas , Placa com crescimento bacteriano:
Salmonellas e S.aureus , Tubo de ensaio , Microscópio óptico , Bico de Bunsen.

Métodos da coloração de Gram
1. Em uma lâmina, contendo esfregaço seco, cubra-o pingando gotas de violeta-de-metila e deixe agir por 15 segundos;
2. Adicione água ao esfregaço, em cima do violeta-de-metila, cobrindo toda a lâmina. Deixe agir por mais 45 segundos;
3. Após o tempo corrido, escorra o corante e lave o esfregaço em um filete de água corrente. Cubra a lâmina com lugol ou Iodo de Gram e deixe por 60 segundos;
4. Escorra todo o lugol e lave em um filete de água corrente;
5. Aplique álcool etílico a 95%, ou acetona, para descorar a lâmina por 10 a