Coloraçao de Gram

Relatório: Coloração de Gram

Objetivos (pag 47 apostila prática de microbiologia):
*Manusear adequadamente um microscópio óptico
*Conhecer os principais métodos de observação microscópica de microorganismos.
* Distinguir, morfologicamente, bactérias, leveduras, bolores e protozoários.
*Identificar os principais tipos morfológicos das bactérias.
*Discutir a importância do método de Gram na identificação de microrganismos.

********************************************************************** Materiais e reagentes:
* Solução salina
*Bico de Bunsen
*Lâminas
*Alça de Drigalski
*Cristal violeta
*Amostras de leveduras, Staphylococcus, coliformes, Clostridium perfringens, Streptococcus suis, Escherichia coli e Bonderella bromchiseptica.
*Lugol
* Solução descorante
*Safranina ou fucsina
*Microscópio para observação

Desenvolvimento:
*Antes da coloração faz-se esfregaço em lâmina da seguinte forma: *Caso a amostra seja sólida, pinga-se 2 gotas de solução salina na lâmina , coloca-se um pouco da amostra de m.o (dentro de zona de esterilização do Bico de Bunsen) e faz-se o esfregaço com alça de Drigalski flambada.
*Caso a amostra de m.o seja líquida, apenas “pesca-se” um pouco dela com alça e faz-se esfregaço na lâmina.
* Fixou-se os esfregaços passando as lâminas 3 vezes no meio da chama do Bico de Bunsen (esfregaço fixado).
*Colocou-se sobre as lâminas o cristal violeta
*Esperou-se 1 minuto
*Lavou-se as lâminas em água corrente
*Colocou-se sobre as lâminas solução de Lugol
*Esperou-se 1 minuto
*Lavou-se as lâminas em água corrente
*Colocou-se sobre as lâminas solução descorante
*Lavou-se as lâminas imediatamente com água corrente.
*Colocou-se sobre as lâminas solução de safranina ou fucsina
*Esperou-se 30 segundos
*Lavou-se em água corrente
*Secou-se a parte de baixo das lâminas
*Observou-se as lâminas ao microscópio