Biotecnologia
Mutagénese dirigida: processo de eng. Proteica pelo qual se altera o código de aa a nível do DNA. Pode ser dirigida, por métodos que alteram nucleotidos específicos no gene clonado ou aleatória, em que há indução de mutações aleatórias num pequeno segmento do gene clonado. Proteínas de fusão: as mm propriedades e actividades (proinsulina humana). Glicobiologia: estudo da estrutura, síntese e desempenho biológico de oligossacáridos e glicoconjugados. Biosensores: sensores extremamente sensíveis e selectivos que convertem acção biológica em sinais eléctricos. Detecção e quantificação de componentes específicos.
Contaminantes (vírus, bactérias, DNA celular, cont. proteicos). Origem: hospedeiro, produto ou processo.
Eliminação de vírus: calor, radiação, pH’s, desinfectantes/detergentes, filtração, precipitados,etc Eliminação de bactérias: filtração. Eliminação de pirogénios: cromatografia de troca iónica. Eliminação de DNA celular: com nucleótidos radioactivos
Eucariotas e Procariotas
Procariotas: organismos simples, facilmente manipuláveis, obtém-se grande quantidade de produto. Não têm capacidade de fazer modificações pós-tradução e podem contaminar o produto. Implica purificação. Eucariotas (fungos): mais complexos, caros, menor quantidade de proteínas produzidas.
Produção de hGH: com E.coli. Fermentação, Centrifugação para recuperar produto, Homogeneização das células ressuspendidas, Pp de ácidos nucleicos, Pp com sulfato de amónia, Cromatografia de troca iónica e catiónica, Pp com sulfato de amónia, Cromatografia de filtração em gele.
Factor VII recombinante, FCH, FSH
Vacina ideal: 100% eficaz a todos os níveis, longa protecção imunológica, não provoca reacções adversas, estabilidade, fácil administração, baratas.
Limitações das vacinas tradicionais: nem todos os mo crescem em culturas; produção de vírus em cultura é cara e tem