Apresenta o Artigo
• O câncer de mama começa como uma doença local e pode sofrer metástase para órgãos distantes;
• É a segunda principal causa de mortalidade relacionada ao câncer em mulheres;
• A conversão de tumores em fase inicial em malignos invasivos, tem sido associada com a ativação da transição epitelial-mesenquimal (EMT);
Alteração no fenótipo celular epitelial para um estado mesenquimal Introdução
Introdução
• A aquisição de propriedades mesenquimais pode promover a separação de células cancerosas facilitando a sua migração subsequente, permitindo então a progressão de metástases;
• As células tumorais recrutam células tronco mesenquimais (MSC) no para seu microambiente tumoral; • Interações entre MSCs e células de câncer de mama pode afetar o fenótipo das células cancerosas e promover o seu potencial metastático;
Introdução
• TGF-β é um dos fatores de crescimento que induz os ativadores de EMT:
– um grupo de fatores de transcrição, incluindo ZEB1 e
ZEB2, que reprimem a expressão do gene epitelial;
– membros da família de miR-200 , que são alvos transcricionais de ZEB1 ZEB2;
Objetivo
• Avaliar o papel da sinalização parácrina das células tronco mesenquimais do tecido adiposo, no estabelecimento e manutenção da transição epitelio-mesenquimal em células de câncer de mama e detectar os mecanismos envolvidos. Materiais e métodos
Cultura de MSC derivadas de tecido adiposo humano
Tecido adiposo foi obtido a lipoaspiração tumescente
Comitê de Ética da
Academia Chinesa de Ciências
Médicas e da
União Pequim
Medical College
Materiais e métodos
Análise Imunofenotípica e Morfológica
CD29, CD44, CD105,
CD106, CD31, CD34 e HLA-DR
FITC e Ficoeritrina
Anticorpo
secundário
Citometria de Fluxo
CellQuest Pro software Materiais e métodos
Cultura celular
MCF7
Câncer de mama
H-DMEM
+ 10%
SFB +
Penicilina
+
Estrepto
micina
Materiais e métodos
Co-cultura por Transwell
Membrana permeável de poro 0,3 μm 1 x 10 5 / poço MCF7 foram semeadas na inserção superior