Xanthomonas - Seminário
3ª Cultura com mais área cultivada no mundo;
Cultivada em mais de 120 países;
Ásia detém 90% da produção mundial
China é o maior produtor do mundo com 30% da produção mundial;
O Brasil é o 9º produtor mundial com 2,1%
Rio Grande do Sul maior produtor brasileiro com 62,7% da produção nacional. “Ferrugem ou mancha” do Arroz
Causada pela bactéria gram-negativa
Xanthomonas oryzae pv. oryzae (Xoo)
Manchas bacterianas são as doenças mais sérias do arroz nos trópicos e na Ásia;
Redução no rendimento da cultura causado por manchas foliares podem ser de até 50%
Interação entre Xoo e arroz
Seqüências completas do genoma de Xoo foram publicadas para as raças japonesa, coreana e filipinas;
Illumina
Interações moleculares entre patógeno e mononucleotídeos das plantas.
Seqüenciamento
Illumina
Seqüenciamento por término reversível:
Genome Analyzer;
3 etapas:
1 – Ligação de adaptadores
2 – PCR em ponte (formação de clusters)
3 - Seqüenciamento
Adição de nucleotídeos não marcados e enzimas
São gerados milhões de clusters de DNA fita simples
O primeiro ciclo de seqüenciamento começa com adição de quatro nucleotídeos marcados reversívelmente, primers e DNA polimerase;
Após excitação com lasers, a fluorescência emitida em cada cluster é capturada por uma câmera e a primeira base é identificada;
O próximo ciclo repete a incorporação de quatro nucleotídeos marcados, primers e DNA polimerase.
Alinhamento de dados
Identificação de fatores relacionados à virulência Genes de resposta (hipersensibilidade e patogenicidade); Produção de exopolissacarídeos (EPS);
Motilidade
Enzimas extra-celulares
Sistemas de secreção
Tipo II (T2S): secreção de fatores de virulência, tais como enzimas extra-celulares como xylanase. Tipo III (T3S): Decodificado pelos genes HrP
(hipersensibilidade e patogenicidade), desempenha um importante papel nas interações entre Xoo e o arroz pela injeção de efetores T3 nas células da planta.