Saneamento básico

OBJETIVO Analisar a água em relação ao seu perfil bacteriológico, através de testes presuntivos (com testes confirmatórios para estes) e ainda fazer a contagem de coliformes totais presentes na amostra.

PRINCÍPIO DO MÉTODO A presença de coliformes na água indica contaminação com o risco potencial da presença de microrganismos patogênicos e a sua ausência é evidência de uma água bacteriologicamente potável (UNICAMP, 2008). O número mais provável (NMP) é a estimativa de densidade de bactérias do grupo coliforme em uma amostra de água calculada a partir da combinação de resultados positivos e negativos, obtidos mediante a técnica dos Tubos Múltiplos (FILHO, 2007). O exame se processa em três fases: (1) Teste Presuntivo: consiste na semeadura de volumes determinados da amostra em tubos de caldo lactosado (CL) que são incubados a 35ºC, durante 24 – 48 horas. Neste caso ocorre uma seleção inicial de organismos que fermentam a lactose com produção de gás. Portanto, a formação do gás a partir da fermentação da lactose é uma prova presuntiva positiva para a presença de bactérias do grupo Coliforme; (2) Teste Confirmativo: consiste na transferência da cultura de todos os tubos positivos de CL, incubados, a 35ºC durante 24–48 horas para tubos contendo Caldo Lactosado Verde Brilhante Bile 2% (CLVBB) que serão incubados também por 24– 48 horas a 35ºC. Este teste reduz a possibilidade de resultados positivos decorrentes da atividade de bactérias esporuladas (falso positivo). A produção de gás a partir da fermentação da lactose é prova confirmativa positiva; (3) Teste Completo: consiste em isolar as bactérias a partir do CLVBB, em placas de Ágar Eosina Azul de Metileno, e depois transferí-las para tubos de C.L. contendo tubo de Durham, e para tubos de ágar simples inclinado. Será positivo quando houver produção de gás a partir da fermentação da lactose nos tubos de CL, e for demonstrada pelo exame microscópico, a presença de Bacilos Gram