Relatório da aula prática: Extração do dna do morango
A extração de ácidos nucléicos é a primeira das várias etapas para os estudos moleculares de um organismo. Na análise de DNA de células eucarióticas, a primeira etapa importante é o seu isolamento. A extração envolve 3 etapas: a ruptura física e química das membranas celulares para liberação do material genético, e, a separação dos cromossomos em seus componentes básicos: DNA e proteínas e a separação do DNA dos demais componentes celulares.
OBJETIVO
Isolar o DNA das células vegetais
MATERIAIS E MÉTODOS
Os materiais que usamos foram: Saco plástico (tipo zip loc), Erlenmeyer, funil, papel de filtro, Tubo de ensaio, bastão de vidro, Álcool etílico gelado, detergente neutro (transparente), sal de cozinha, água mineral, pipeta de Pasteur, lâmina, lamínula, microscópio, béquer, material biológico: morangos e papel filtro.
Colocamos a fruta previamente lavada e sem o cálice no saco plástico zip lock, esmagamos com o punho (com cuidado para não rasgar o saco) até que obteve-se um extrato homogêneo, depois de 2 minutos adicionamos 10 mL da solução de exração (detergente+sal+água) ao conteúdo do saco, misturamos tudo, apertando durante 1 minuto com as mãos, derramamos o extrato no aparato filtrante (Erlenmeyer + funil com filtro, ou coador); deixamos filtrar em um recipiente (Béquer de 50mL); transferimos a parte líquida o filtrada para um tubo de ensaio de 20mL (sem encher totalmente o tubo, somente até 1/4 - 5mL - do seu volume total); derramamos devagar o etanol gelado no tubo (deixando-o escorrer vagarosamente pela borda), até que o mesmo estivesse pela metade do tubo de ensaio 10ml), a fim de que se formem duas fases, a superior, alcoólica e a inferior aquosa; mantivemos o tubo ao nível dos olhos para observar o que está acontecendo; mergulhamos o bastão de vidro ou palito de madeira dentro do tubo até o local onde a camada de etanol faz contato com a camada de extrato flutuante (região esbranquiçada sobrenadante); e por fim retiramos