Produção de Insulina
ARTIFICIAL POR ENGENHARIA
GENÉTICA
INTRODUÇÃO
• Insulina : hormônio de cadeia polipeptídica, descoberto em 1921 por Frederick Grant Banting e John James
Rickard Macleod (Nobel de Medicina, 1923)
INTRODUÇÃO
• Frederick Sanger (Nobel de Química, 1958): as propriedades específicas da insulina reside na sua estrutura primária (sequência de aminoácidos).
Regulação da glicemia pelos hormônios Glucagon e Insulina
INTRODUÇÃO
• Diabetes mellitus : doença crônica em que ocorre deficiência na produção, secreção e ação da insulina.
Outro sintoma característico....
Hálito Cetônico
Hálito de Maça
Podre
TRATAMENTOS
Produção de Insulina Artificial
Método Clássico
DNA recombiante OBJETIVO
Apresentar o processo de fabricação da produção artificial de insulina humana por DNA recombinante, mostrando as vantagens e desvantagens em relação ao método clássico.
Produção de insulina através do DNA recombinante
Extração
A pró-insulina precipitada na forma de corpos de inclusão é solubilizada em um solvente rigorosamente selecionado;
Determina-se a Temperatura, o tempo e a velocidade de rotação do impelidor que promove a agitação da suspensão.
(Fatores
determinantes na eficiência da extração e consequentemente purificação)
Purificação
A pró-insulina produzida precipita na forma de corpos de inclusão dentro da célula .
E por novas etapas de purificação por RPHPLC e cristalização.
Obtem-se assim o cristal de insulina.
É parcialmente purificada dos demais resíduos, por meio de cromatografia de afinidade. A insulina é então submetida a novas etapas de purificação por troca iônica.
Os cristais de insulina servirão de insumo para as indústrias farmacêuticas. A pró-insulina é renaturada por meio de ligações intramoleculares e pontes de di-sulfeto
Depois é convertida em insulina* através de reações químicoenzimáticas .