pop ureia uv
PROCEDIMENTO OPERACIONAL PADRÃO (POP)
Nº 01
REVISÃO:
00
URÉIA UV LIQUIFORM
PAG.
01/01
1.0 FINALIDADE
Sistema enzimático para a determinação da uréia no soro, plasma e urina por fotometria em ultravioleta usando cinética de dois pontos (tempo fixo).
Somente para uso diagnóstico in vitro .
2.0 PRINCÍPIO
A uréia é hidrolisada pela urease produzindo amônia e dióxido de carbono.
Urease
Uréia + H2O 2 NH3 + CO2
A amônia reage com o 2-cetoglutarato e NADH em uma reação catalisada pela glutamato desidrogenase (GLDH), promovendo a oxidação do NADH a NAD. A consequente redução da absorbância medida em 340 nm é proporcional á concentração de uréia na amostra.
GLDH
2- cetoglutarato + NH3 + NADH L-Glutamato + NAD
3.0 SIGNIFICADOS CLÍNICOS Catabolismo elevado (febre, septicemia).
Hemorragia interna
Pré-renais (insuficiência cardíaca congestiva) Causas renais (nefrites, pielonefrites e insuficiência renal aguda ou crônica).
Causas pós-renais (obstruções das vias urinárias, cálculos, carcinomas ou pólipos).
LABORIAL
PROCEDIMENTO OPERACIONAL PADRÃO (POP)
Nº 01
REVISÃO:
00
URÉIA UV LIQUIFORM
PAG.
01/02
4.0 INFLUÊNCIAS PRÉ-ANALÍTICAS
- Não aplicável
5.0 AMOSTRAS
Preparo do paciente
- Não aplicável
Amostras utilizadas
Soro ou plasma (fluoreto, heparina, ETDA) e urina.
Não usar anticoagulantes contendo amônia.
Estabilidade e armazenamento da amostra
O analito é estável no soro ou no plasma por 12 horas entre 15- 25 ºC e 3 dias entre 2-8 ºC .
6.0 METODOLOGIA
- Enzimático UV
7.0 REAGENTES
1- Contém tampão 20 mmol/L, pH 10,0; 2-cetoglutarato 16 mmol/L;
NADH 300 mol/L; azida sódica 30,8 mmol/L e surfactante.
2- Contém tampão 300 mmol/L, pH 8,0; urease > 50000U/L; GLDH >3750 U/L; azida sódica 14,6mmol, conservante e surfactante.
3- Padrão- Contém uréia 70 mg/dL e azida sódica 7,7mmol/L.