Pop espermograma

PROCEDIMENTO OPERACIONAL PADRÃO – POP
ESPERMOGRAMA
Abstinência sexual de no mínimo 5 dias, podendo variar de 2 a 7 dias.
Coleta deve ocorrer de preferencia no laboratório.
Antes da coleta, higienizar as mãos e pênis.
Amostra deve ser coletada por masturbação, em frasco limpo de vidro ou plástico e de boca larga.
Após identificar a amostra e informar o horário da coleta.
Técnica de espermograma
Aspectos Físico-Químico
1. Deixar amostra liquefazer por 60 minutos em temperatura ambiente.

2. Verificar o pH, com a fita especifica:
Pingar uma ou duas gotas na fita reagente, aguarde alguns segundos e compare a coloração obtida com o valor da escala, disponível na caixa das fitinhas.
Valores normais: 7,2 a 8,0

3. Transferir o sêmen para um tudo de cônico.

4. verificar o aspecto se a amostra esta homogênea.

5. Verificar o volume:

Valores normais: 2,0 a 5,0 mL
Valores menores que 1 mL são insuficientes para análise.

6. verificar a viscosidade, se está em forma de “gotejamento”.
7. Verificar a cor:
Cinza claro à branco opalescente, transformando em translucido após liquefação.

8. Verificar odor

Aspectos Microscópicos
Teste hiposmotico (verifica a integridade celular da membrana da cauda do espermatozoide).
1. pipetar 0,5 mL de solução hipoosmotica em um eppendorff, acrescentar 1 gota de sêmen e incubar a 37°C por 15 minutos.
Após passar os 15 minutos, pipetar 10 µL da solução, colocar em uma lamina e cobrir com uma lamínula e contar 100 espermatozoides, anotando a proporção de caudas retas e enroladas.
Teste de vitalidade (espermatozoides vivos não coram e mortos por terem sua membrana lesada coram-se de rosa).
2. pipetar 0,5 mL de eosina em um eppendorff, acrescentar uma gota de sêmen e incubar a 37°C por 15 minutos.
Após os 15 minutos, pipetar 10 µL da solução, colocar em uma lamina e cobrir com uma lamínula e contar 100 espermatozoides na objetiva de 40X e verificar quantos estão corados de rosa e quantos não estão corados. (utilizar o contador de células).
3.