Métodos de Cultura de linhas de células
Introdução Teórica………………………………………………………………………………………………………3
Objetivos…………………………………………………………………………………………………………………….4
Materiais e equipamentos utilizados…………………………………………………………………………..5
Procedimento……………………………………………………………………………………………………………..5
Resultados Obtidos……………………………………………………………………………………………………..6
Discussão……………………………………………………………………………………………………………………8
Bibliografia………………………………………………………………………………………………………………….9
Introdução Teórica
As células animais e vegetais, isoladas de tecidos vivos, podem continuar a crescer in vitro se os nutrientes e todos os outros fatores necessários à sua sobrevivência, crescimento e proliferação forem corretamente fornecidos. Quando este processo é realizado em laboratório, em condições controladas de temperatura, humidade, oxigênio e dióxido de carbono, é designado por cultura celular. Para trabalhar com cultura de células animais é necessário um conjunto de técnicas assépticas de esterilização para que tudo corra como desejado.
Para evitar contaminações realiza-se o trabalho numa sala de cultura de células e numa câmara de fluxo laminar pois garante as condições de assepsia necessárias. As condições devem assegurar a estabilidade das células, por isso deve-se dispor de incubadoras próprias, a temperatura de 37°C e a atmosfera 5% de CO2.
É necessário fazer a manutenção do meio de cultura das células para que possa haver crescimento e durabilidade das mesmas. Para isso é necessário preparar um meio de cultura adequado a partir de soluções estéreis. Deve possuir na sua composição sais inorgânicos (tais como cálcio, ferro, magnésio, potássio, entre outros), aminoácidos essenciais e não essenciais, vitaminas, antibióticos, uma fonte de energia, como a glicose e um indicador de pH.
Para a esterilização de qualquer tipo de materiais deve ser utilizado etanol a 70% em vez de etanol a 90%, pois como o primeiro contém uma maior percentagem de H2O, penetra mais eficazmente na parede celular e