Morais et al

2158 palavras 9 páginas
XX Encontro de Iniciação à Pesquisa
Universidade de Fortaleza
20 à 24 de Outubro de 2014

Análise de inserções do gene da glucocerebrosidase humana (hGCase) em tecido fetal de clone caprino transgênico
Arthus Sales Morais¹, ²*, Leonardo Tondello Martins1,3* Raquel de Mello e Pinho1*, Luciana Relly Bertolini4*, Marcelo Bertolini4*

1. Universidade de Fortaleza – Laboratório de Biologia Molecular e do Desenvolvimento
2. Universidade de Fortaleza – Aluno IC PIBIC, Curso de Farmácia
3. RENORBIO - Alunos de doutorado
4.Universidade de Fortaleza – Curso de Medicina, Professor Orientador

*arthusmorais@gmail.com

Palavras-chave: FISH, Souhern Blot. hGCase humana. Transgênico.

Resumo

A produção de um medicamento nacional através da modificação genética em cabras expressando glucocerebrosidase humana (hGCase) em seu leite é uma solução economicamente viável para o tratamento da doença de Gaucher, que é caracterizada pelo acúmulo intralisossomal de glucocerebrosídeos decorrente da ausência funcional da enzima hGCase requerendo terapia de reposição enzimática específica e contínua. Visando a certificação e a caracterização de um animal transgênico fundador para o gene hGCase, foi utilizado o Kit DIG High Prime DNA Labeling e Detection Starter Kit II (Roche) para a análises pelas técnicas de Southern Blot e de hibridização in situ por fluorescência (Fluorescence in situ Hybridization, FISH), com o intuito de determinar o número de inserções do transgene em fibroblastos de caprino clone transgênico fundador. Em ambas as técnicas, foi observada a presença de uma inserção única do transgene para a hGCase, com provavelduas cópias em tandem, certificando a eficácia das técnicas empregadas para estas análises. Desta forma, determina-se que o acasalamento simples será efetivo para a transmissão Mendeliana do transgene nas progênies futuras. Introdução

A doença de Gaucher (DG) é uma doença genética autossômica recessiva em humanos, causada por mutações do gene da

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