Microbiologia

OBJETIVO
Colher material para análise laboratorial e detecção de microrganismos. Sendo assim, avaliar as alterações promovidas a partir do crescimento dos tais microorganismos.
BASES TEÓRICAS
Cultura bacteriana crescida em meio sólido ou líquido, com um corante primário, o cristal violeta, seguido de tratamento com um fixador, o lugol. Tanto bactérias Gram-positivas quanto Gram-negativas absorvem de maneira idêntica o corante primário e o fixador, adquirindo uma coloração violeta devido à formação de um complexo cristal violeta-iodo, insolúvel, em seus citoplasmas.
PONTOS DE COLETA
 Bebedouro bucal  Telefone Público  Banheiro Feminino  Dedo indicador de uma colega de sala
DESCRIÇÃO DAS ATIVIDADES
1. Utilizada uma Lâmina de vidro com uma fina camada de bactérias fixa (esfregaço); 2. O esfregaço foi coberto com cristal violeta por 1 minuto. 3. Enxaguamos com água; 4. Acrescentamos o lugol e deixamos agir por 1 minuto. 5. Descorar com álcool-acetona por 30 segundos. 6. Enxaguar em água corrente;
7. Cobrir com fucsina por 30 segundos. 8. Enxaguar em água. 9. Deixar secar.
PROCEDIMENTO
 Pegamos a lâmina e fizemos o esfregaço com células oriundas de colônias desenvolvidas dos meios de cultura Agar Nutriente (AN) [gram positivos] - Agar MacConkey (MC) [gram negativos] separadamente.
 Fixou-se o esfregaço na chama do Bico de Bunsen. Cobriu-se o esfregaço com solução aquosa de cristal violeta durante 1 min.
 Depois de 1 minuto lavamos as lâminas com água corrente
 Cobriu-se o esfregaço com lugol, mantendo as lâminas dentro de uma Placa de Petri durante 1 min.
 Pingamos algumas gostas de álcool sobre o esfregaço até que não escorresse mais corante.
 Acrescentamos o corante de fucsina sobre o esfregaço durante 30 s.
 Lavamos as lâminas com água, retirando o excesso de corante.
 Secamos as mesmas com papel, com o cuidado de não tocar na área do esfregaço.
 Examinamos as lâminas em microscópio.