lucas de castro bile
Aluno: Lucas de Castro Bilé
Pólo: Nova Friburgo Disciplina: Bioquimica II
Relatório da Prática de Fermentação
Introdução
A fermentação é um processo biológico anaeróbico, no qual açúcares como a glicose, frutose e sacarose são parcialmente convertidos em energia celular, podendo gerar produtos como o etanol, lactato e CO2. O produto formado no final da fermentação vai depender do organismo que a promove, no caso desta prática em laboratório vamos utilizar leveduras, que fazem a fermentação alcoólica, produzindo ao fim da via etanol e CO2. Vamos medir por meio dos procedimentos listados abaixo a quantidade de CO2 produzido e a quantidade de substrato (sacarose) utilizado.
Materiais e métodos Levedura ;
Sacarose;
Água;
Seliwanoff;
Beckers;
Pipetas;
Tubos de ensaio;
Spectofotômetro;
Banho-maria.
Procedimentos
1. Diluir 3g de levedura em 100ml de água mineral em um becker e reservar;
2. Diluir 10g de sacarose em 100ml de água em um Becker;
3. Diluir 300ml da solução de sacarose 10% em 270ml de água em um Becker para obter uma solução com concentração de sacarose 1%.
4. Colocar 80ml da solução de sacarose 1% em Banho-maria à 40°C;
5. Enumerar 11 tubos e pipetar solução de sacarose 1% e água de acordo com os valores da tabela 1;
6. Diluir as soluções do 5º passo em 10x (obter solução de sacarose %): enumerar 11 novos tubos de ensaio e pipetar 0,3ml de cada tubo do 5º passo em seu novo tubo respectivo e completar todos com 2,7ml de água;
7. Enumerar 11 tubos de ensaio para fazer a dosagem de sacarose com o Seliwanoff: Pipetar 0,5ml de sacarose, dos tubos do 6º passo nos respectivos novos tubos, e 2,0ml de Seliwanoff;
8. Colocar os tubos de falcon em Banho-maria: O tubo com a tampa furada deve ser colocado com a tampa virada para o fundo, dentro do Becker com 250ml de solução de sacarose 1%, que já estava em Banho-maria à 40°C; e o outro tubo é colocado normalmente no Banho-maria à 40°C;