Isolamento e Caracterização de um Glucan Tipo polissacarídeo
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INTRODUÇÃO
O cogumelo L. Deliciosus é comestível muito apreciado devido ao seu excelente sabor.
Cresce em florestas de pinheiros e é geralmente encontrado na Europa , Ásia e América do Norte.
Bioativos
Fitoesteróis
Ácidos graxos poliinsaturados compostos fenólicos carotenóides Lactarius deliciosus
INTRODUÇÃO
Os polissacarídeos têm sido motivo de investigação , devido à sua capacidade de atuar como moduladores imunitários e por causa das suas propriedades antioxidantes.
Geralmente, são glicanas.
Polissacarídeos lineares, não ramificado, compostos por unidades de glicose unidas por ligações do tipo β1-4 e β1-3.
MATERIAIS E MÉTODOS
A amostra de cogumelo:
Lavar os corpos de frutificação
(Água destilada)
Liofilizar
Armazenados
(vácuo, à 4°C)
Moer
(Partículas D < 500µm)
EXTRAÇÃO E PURIFICAÇÃO DE GLICANAS
Metanol
(65°C – 8h)
Extração água
(temp. ambiente e outra fração à
100°C)
Precipitação
(ác.
Tricloroacético)
Centrifugar
(sobrenadante
transparente)
Hidrólise enzimática (Pronase)
Dissolução
(água destilada)
Precipitação com etanol 2:1 (v/v)
Dissolução
(água destilada)
Precipitação dos polissacarídeos (acetona)
Evaporação
(corrente de azoto)
DETERMINAÇÃO DA HOMOGEINEDADE DA GLICANA E
SEU TAMANHO MOLECULAR
A homogeneidade e a massa molar das frações foram determinadas usando um sistema de
HPLC.
Para selecionar o tamanho as amostras foram dissolvidas em água e filtrada através de um filtro de 0,45µm de nylon. (preparo da amostra no HPLC)
COMPOSIÇÃO DAS FRAÇÕES DE MONOSSACARÍDEO
Os resíduos foram reduzidos e acetilados.
Os resíduos foram extraídos com clorofórmio, secado com MgSO4, e o solvente foi evaporado sob corrente de azoto.
Os acetatos de alditol resultantes foram analisados por um cromatográfico de gás. O hélio foi utilizado como um gás de transporte,
ANÁLISE DE