Fisiologia Vegetal

Experimento 1: Separação dos pigmentos por cromatografia de papel de filtros
Objetivo: Separar e observar os diversos pigmentos fotossintetizantes.
Materiais utilizados:
- Material Biológico: Spinacia oleraceae (Chenopodiacear – espinafre)
- Vidraria: béquer (50 mL)
- Drogas: álcool etílico 90%
- Outros materiais: almofariz; tira de papel de filtro (20 cm x 4 cm); tesoura.
Procedimento:
Colocamos no almofariz 3 folhas de espinafre picotados, em seguida colocamos 10 mL de álcool etílico (O roteiro pedia 20 mL, porém a professora disse que 10 mL seria o suficiente.) e maceramos até que ficasse homogêneo.
Passamos para o béquer com cuidado para que o material vegetal permanecesse no almofariz.

Em seguida colocamos o filtro de papel (aproximadamente 20x4 cm) no béquer, deixando o base o mais reta possível.

Feito isso, o béquer permaneceu na bancada por cerca de 1 hora, até que foi possível observar o resultado:

Na camada esverdeada temos a clorofila, porém não conseguimos diferenciá-las entre clorofila A e clorofila B, pois estas não se separam.
Na camada amarelada temos os carotenoides.
Verificação de aproveitamento:
1 - As clorofilas são polares e logo tiveram uma maior interação com o papel já que o mesmo é constituído de celulose (polar), assim apresentaram um maior fator de retenção ficando mais retidas no papel e sendo mais difíceis de serem arrastadas em um solvente apolar (álcool etílico). Os Carotenóides apresentaram o maior fator de retenção, já que o mesmo sofreu influência maior do eluente apolar, fazendo assim com que ocupe a parte mais alta do papel.
2- Porque ambas são polares e acabam tendo uma forte interação com o papel, o que dificulta o processo de separação.