Fidelidade Gen Tica De Brota Es Da Pereira

Ciência Rural, Santa Maria,
Avaliação
v.33, da
n.3,
fidelidade
p.449-454,
genotípica mai-jun,por 2003 marcadores RAPDs de brotações de pereira...

449

ISSN 0103-8478

Avaliação da fidelidade genotípica por marcadores RAPDs de brotações de pereira (Pyrus communis L.) cv. Carrick, regeneradas in vitro1

Evaluation of the genotypic fidelity by RAPD markers of pear shoots (Pyrus communis L.) cv. Carrick, in vitro regenerated

Alan Cristiano Erig2 Márcia Wulff Schuch3

RESUMO
O objetivo deste trabalho foi avaliar a fidelidade genotípica de brotações de pereira (Pyrus communis L.) cultivar
Carrick, regeneradas in vitro, utilizando marcadores RAPDs.
O DNA genômico foi extraído de folhas oriundas das brotações de pereira regeneradas a partir de diferentes tratamentos e de plantas matrizes micropropagadas (planta controle), utilizando-se o protocolo descrito por FERREIRA &
GRATTAPAGLIA (1996). Para triagem dos primers foram utilizados os kits OPAN, OPA e OPF (Operon Technologies,
Inc.) e, destes, foram escolhidos sete primers: OPAN-03, OPAN14, OPAN-15, OPAN-16, OPA-02, OPA-08 e OPF-04. A separação dos produtos da amplificação foi realizada através de eletroforese horizontal em gel de agarose 1,2%, corado com brometo de etídio. Após a corrida, os géis foram visualizados sobre um transiluminador de luz ultravioleta e fotografados com câmara Polaroid para registro dos dados. A ausência ou adição de uma ou mais bandas comparativamente ao padrão da planta matriz (planta controle) foi considerado variação somaclonal. Dos 66 fragmentos produzidos pelos sete primers, observou-se 100% de bandas monomórficas, indicando que nenhum dos primers utilizados detectou variação somaclonal nas brotações regeneradas.
Palavras-chave: pereira; variação somaclonal; marcadores moleculares; RAPD.
ABSTRACT
The aim of this work was to evaluate the genotypic fidelity of pear shoots (Pyrus communis L.) cultivar Carrick regenerated in vitro, using RAPD markers. Genomic DNA was extracted from leaves