farmacia
Leitura de lâminas e técnicas de esfregaço, fixação e coloração de lâminas.
Materiais e equipamentos
• Microscópio;
• Lâmina pronta;
• Óleo de imersão;
• Pipeta automática 0,001 ml;
• Ponteiras;
• Lamina limpa;
• Amostra de sangue total;
• Metanol;
• Eosina;
• Azul de metileno.
Procedimento para leitura das lâminas:
Ligar microscópio, posicionar a lâmina na bandeja e prendê-la com a presilha. Focar primeiramente com a objetiva de 4 vezes, usando apenas o macrometro e micrometro.
Após focalizar com as objetivas de 10 vezes e 40 vezes usando o micrometro, pingar uma gota de óleo de imersão sobre a lâmina e posicionar a objetiva de 100 vezes sobre o óleo, que vai viabilizar a visualização. Observar os vários tipos celulares e suas diferentes formas com presença de lóbulos e grânulos que os diferencia tanto pela cor pelo tamanho e quantidades celulares, neste último caso a presença em quantidades alteradas podem representar patologias no organismo.
Técnica de esfregaço
Retira-se uma amostra do sangue total do tubo de EDTA, previamente coletado, e pipetar uma gota sobre a lâmina numa borda da lâmina.
Utilizar uma lâmina com lamínula adesivada para fazer o espalhamento sobre a outra lamina que será visualizada no microscópio.
Posicionar a lamínula a mais ou menos 45° sobre a gota e deslizar suavemente até a outra borda e deixar secar.
Técnica de fixação e coloração das lâminas
Após feito o esfregaço (espalhamento), mergulha-se a lâmina 15 vezes no metanol (fixador de cor azul), tirando o excesso em papel absorvente, em seguida mergulhar 15 vezes na eosina (corante alaranjado) e 20 vezes no azul de metileno (corante azul escuro), sempre tirando o excesso. E finalmente a lâmina é lavada em uma quantidade pequena de água corrente e colocada para secar. Após secagem as lâminas estão prontas para serem observadas.
Resultados
Nas lâminas preparadas foram observadas as células sanguíneas como: eosinófilos, monócitos,