EXTRAÇÃO DE DNA

AULA PRÁTICA

EXTRAÇÃO DE DNA

INTRODUÇÃO

Descoberto em 1953 por James Watson e Francis Crick, o DNA é uma molécula polimérica extensa que possui variabilidade potencial necessária para um material genético. A unidade básica da molécula de DNA é o nucleotídeo, que é constituído de três componentes distintos: um açúcar, uma base nitrogenada e um ácido fosfórico. No DNA, o açúcar do nucleotídeo é uma pentose, chamada 2'-desoxirribose, e o nucleotídeo se apresenta de forma anelar. A denominação 2'-desoxirribose indica que a estrutura padrão da ribose foi alterada através da substituição do grupamento hidroxila (-OH) ligado ao carbono 2' por um hidrogênio (-H). As bases nitrogenadas são estruturas de anel simples ou duplo. As de anel simples são chamadas pirimídicas e as com anel duplo são chamadas de púricas. Elas estão ligadas ao carbono 1' do açúcar, e qualquer uma das quatro bases nitrogenadas diferentes - Adenina, Timina, Citosina e Guanina - podem ser ligadas nesta posição. Uma molécula que contenha um açúcar unido a uma base é chamada nucleosídeo. Este é convertido a nucleotídeo através da ligação de um grupamento ácido fosfórico ao carbono 5' do açúcar. Até três grupamentos fosfato independentes podem ser ligados em série para formar um monofosfato de nucleosídeo, difosfato de nucleosídeo ou trifosfato de nucleosídeo.)

O DNA é constituído por duas fitas e estas apresentam polaridade inversa, ou seja, enquanto uma está no sentido 5', 3', a outra encontra-se no sentido 3', 5' As bases nitrogenadas encontram-se sempre no interior – visto que são hidrofóbicas - da dupla hélice, de giro helicoidal e para a direita, do DNA. Elas se ligam a partir de pontes de hidrogênio tendo, cada base, seu par correspondente. Esta é a explicação para a Lei de Proporções, proposta por Chargaff; as pontes de hidrogênio são as únicas forças atrativas entre os polinucleotídeos e fazem com que a Adenina se