extração de DNA

RELATORIO IZABEL
INTRODUÇÃO
OBJETIVO
Demonstrar experimentalmente a extração de ácidos nucleicos
MATERIAL
METODO
1. Cortar o tomate em pedaços pequenos
2. Preparar a Solução de lise (2 gramas de sal, 10 ml de detergente e completar o resto da solução ate 100 ml com agua)
3. Deixar por 15 minutos em banho maria
4. Deixar 15 minutos em banho de gelo
5. Filtrar o material em uma peneira
6. Acrescentar à solução filtrada 100 ml de álcool gelado
RESULTADO
Após o álcool acrescentado, ira se formar uma solução aquosa (sobrenadante) constituída de pectina (um polissacarídeo) e no fundo uma solução mais concentrada, entre essas duas soluções, estará o acido nucleico condensado. Depois que o procedimento é realizado é possível visualizar facilmente pequenos grumos esbranquiçados que são os filamentos de DNA. Lembre-se que a visualização a olho nu é possível porque a quantidade de DNA é muito grande e os filamentos estão todos agrupados.

DISCUSSÃO
OBS: a extração de DNA de células eucariontes conta fundamentalmente de três etapas:
Ruptura das células para liberação dos núcleos
Desmembramento dos cromossomos em seus componentes básicos (DNA e proteínas)
Separação do DNA dos demais componentes celulares

As amostras precisam ser maceradas para o rompimento da parede celular e da membrana plasmática. Na solução de lise, o sal fornece íons que são necessários para a fase de precipitação do acido nucleico, pois o DNA encontrasse dissolvido na agua e na presença de álcool e de altas concentrações de Na+ o DNA é precipitado, assim o precipitado aparece na superfície da solução, entre a mistura aquosa e o “etanol”. Numerosas moléculas de DNA podem coexistir nessa solução. O detergente desintegra os núcleos e os cromossomos das células da fruta, liberando o DNA, isso ocorre pois, um dos componentes do detergente, o dodecil (ou lauril) sulfato de sódio, desnatura as proteínas, separando-as do DNA cromossômico. O DNA não se dissolve no álcool, na concentração